ClC-3在成骨细胞力学信号转导中的作用研究

发布时间：2021-01-28 06:25

　　骨组织最容易受周围力学环境变化的影响，从而在形态结构和骨量上发生改变。适宜的机械刺激可抑制骨吸收并增加骨的生成。研究表明有许多离子通道与细胞的成骨分化有关，如Ca2+、K+等，但作为体内最主要的阴离子通道——氯通道，其作用还知之甚少。ClC-3为电压门控氯通道之一，早先被定义为容积敏感氯通道；近年研究表明ClC-3的作用不仅仅局限于细胞容积调控，它与细胞增殖、凋亡、破骨细胞的细胞内酸化调节等相关。成骨细胞在力学刺激下，伴随细胞容积的变化，是否是ClC-3介导了这种变化还不清楚。本研究通过细胞体外培养、体外加力实验、siRNA等技术探讨ClC-3作为力学刺激敏感氯通道的可能性。ClC型氯通道是一个基因家族，是电压门控氯通道。其中，ClC-3、ClC-4和ClC-5由于其基因序列相似而成为一个主要分支，为内体系统氯通道。近年许多研究发现， ClC-3氯通道可能与细胞的成骨分化有关。本研究通过自行研制的加力装置，对体外培养的小鼠成骨样细胞系MC3T3-E1进行持续性静压力刺激，成功建立了体外加压模型。通过倒置显微镜观察细胞形态变化，并用实时定量PCR检测其受压力后相关成骨因子和细胞内调节成骨... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

ClC型氯离子通道的拓扑结构

成骨细胞呈多角样、不规则形，排列也无明显规则（图2）；1atm 压力条件下培养 8h 时，细胞形态与对照组相比无明显改变，只是密度降低，有少部分细胞死亡，细胞单个分布，形态多样，边缘清晰（图 3）。对照组常规培养 24h 时，与同组培养 8h 相比细胞增殖明显，细胞形态呈多边形，分布均匀、排列紧密（图 4）；1atm 压力条件下培养 24h 时，细胞密度虽较同组培养 8h 有所增加，但仍低于同时间点对照组，且细胞形态呈梭形，多以突起相互连接（图 5）。Bars=50μm3.2 压力刺激对细胞成骨相关因子 mRNA 表达的影响小鼠成骨细胞系 MC3T3-E1，在 1atm 加压条件下分别培养 8h、24h 后，一些成骨相关基因表达有增强，显著高于对照组。可以看到，在 8h 后表达量明显升高

加压组8h

【参考文献】：
期刊论文
[1]氯离子通道的研究进展[J]. 张巧智.  华章. 2012 (09)
[2]Wnt/Dkk在骨改建中对成骨细胞和破骨细胞的双向调节作用[J]. 许连静,秦明群.  江苏医药. 2010(16)
[3]ClC型氯离子通道的研究[J]. 陈丽娥,谢浩.  生命的化学. 2010(04)
[4]进行性半侧颜面萎缩研究进展[J]. 余新,冯艳梅,殷善开.  临床耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2009(10)
[5]进行性半侧颜面萎缩病因学研究进展[J]. 宋涛,归来.  中国美容医学. 2007(06)
[6]进行性半侧颜面萎缩的病因研究及治疗进展[J]. 高寿松,滕利.  组织工程与重建外科杂志. 2006(06)
[7]Cbfa1/Runx2与成骨细胞分化调控[J]. 王国红,李祺福.  生命科学. 2005(01)
[8]ClC型氯离子通道[J]. 郭晓强.  生理科学进展. 2005(01)
[9]氯离子通道ClC-3研究进展[J]. 陈临溪,关永源.  中国药理学通报. 2002(05)
[10]进行性半侧颜面萎缩[J]. 周卫兵,徐立平,许彪.  中华医学美容杂志. 2001(02)



本文编号：3004510