转录因子GATA4通过作用于GNAI3调控牙齿发育

发布时间：2021-09-28 01:39

　　研究目的:通过体内观测GATA4条件性敲基因小鼠表型,体外提取人根尖牙乳头干细胞（SCAPs）进行培养来探究GATA4在牙齿发育过程中的作用。研究方法:利用基于Cre/Lox P系统的条件性基因敲除技术,建立了神经嵴细胞特异性敲除GATA4基因的小鼠模型。使用Micro-CT和苏木素-伊红（HE）染色对比观测出生前、出生后的GATA4^fl/fl及Wnt1-Cre;GATA4^fl/fl的小鼠牙齿发育状况;免疫组化用来观测GATA4^fl/fl及Wnt1-Cre;GATA4^fl/fl小鼠牙齿发育过程中GATA4和各项成骨成牙指标（RUNX2、OSX、OPN、OCN、BMP4）的表达情况,以及根尖牙乳头处细胞的增殖变化。体外通过提取SCAPs,并加以鉴定,继而以慢病毒为载体,通过RNA干扰的方法将SCAPs中的GATA4沉默,验证敲低效率;CCK8实验观测细胞增殖能力;划痕实验观测细胞迁徙能力;对沉默GATA4的SCAPs进行牙向/骨向诱导,碱性磷酸酶（ALP）染色和活性检测以及茜素红染色（ARS）和钙离子... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：99 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

21、P56dWnt1-Cre;GATA4fl/fl小鼠出现短根畸形

图 2. E15.5 天 Wnt1-Cre;GATA4fl/fl小鼠牙胚发育缺陷3.3 GATA4 在小鼠牙齿发育过程中的表达胚胎 14.5、15.5、17.5 天和出生后 14 天野生型小鼠牙齿石蜡切片做免疫组化染色，显示 GATA4 广泛表达于成釉细胞、牙间充质细胞以及成牙本质细胞中（图 3）。

2. E15.5 天 Wnt1-Cre;GATA4fl/fl小鼠牙胚发育缺鼠牙齿发育过程中的表达15.5、17.5 天和出生后 14 天野生型小鼠牙齿石ATA4 广泛表达于成釉细胞、牙间充质细胞以及


本文编号：3411001