人精子线粒体DNA4977bp缺失与精子活力的相关性研究

发布时间：2017-05-14 17:00

  本文关键词：人精子线粒体DNA4977bp缺失与精子活力的相关性研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:通过比较弱精子症、少弱精子症、少精子症与正常参数人群精子mtDNA 4977 bp缺失的差异,探讨精子mtDNA 4977 bp缺失对精子活力以及男性生育能力的相关性。方法:收集2014年2月至2014年7月江西省妇幼保健院辅助生殖中心门诊精液检查样本902例,经CASA软件分析,按WHO第五版精液参数标准,精子前向运动率32%,精子浓度15×106/ml,纳入弱精子症组;精子前向运动率32%,精子浓度15×106/ml,纳入少精子症组;精子前向运动率32%,精子浓度15×106/ml,纳入少弱精子症组,其中又根据严重程度分活动精子组和不动精子组(不动精子率=100%)两个组。曾有过生育史或者有使女性受孕史的正常精液参数的样本纳入正常对照组。提取精子基因组DNA后用特异性PCR引物进行mtDNA 4977bp PCR扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳,比较各组间mtDNA 4977bp缺失的差异。对电泳所得目的片段进行胶回收测序,确定PCR扩增片段是否为mtDNA4977bp缺失。结果:正常对照组共345份样本,线粒体DNA 4977 bp缺失的样本共10份,缺失比率为2.9%。弱精子症组共278份样本,线粒体DNA 4977 bp缺失的样本共24份,缺失比率为8.63%。少弱精子症组共200份样本,线粒体DNA 4977 bp缺失的样本共33份,缺失比率为16.5%,其中23份为完全不动精子,线粒体DNA 4977 bp缺失的样本共6份其比率高达26.1%。少精子症组共79份样本,线粒体DNA 4977 bp缺失的样本共2份,缺失比率为2.53%。各组间缺失比率比较:弱精子症组和少弱精子症组的线粒体DNA 4977 bp缺失率高于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05),少精子症组缺失率与正常对照组之间无显著差异。结论:精子线粒体DNA 4977 bp缺失率在弱精子症和少弱精子症患者中高于正常精液参数男性,表明精子线粒体DNA 4977 bp缺失与精子活力降低有关,可能参与了精子活力降低的致病过程。
【关键词】：线粒体DNA缺失 线粒体DNA 4977 bp缺失 男性不育 弱精子症
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R698.2
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-9
• 第1章 引言9-13
• 第2章 材料与方法13-20
• 2.1 研究对象13
• 2.1.1 样本收集方法13
• 2.1.2 样本分组方法13
• 2.2 主要仪器，，实验试剂及实验试剂的配置13-15
• 2.2.1 主要仪器13-14
• 2.2.2 主要试剂及配置14-15
• 2.3 实验方法15-20
• 2.3.1 精子的纯化15
• 2.3.2 精子基因组DNA的提取15-16
• 2.3.3 精子基因组DNA纯度及浓度测定16
• 2.3.4 引物设计与合成16-17
• 2.3.5 精子线粒体DNA 4977 bp PCR扩增17-18
• 2.3.6 PCR反应产物电泳18-19
• 2.3.7 PCR反应产物电泳后胶回收19
• 2.3.8 胶回收DNA测序19
• 2.3.9 DNASTAR软件比对19-20
• 第3章 结果20-27
• 3.1 基因组DNA提取20
• 3.2 PCR电泳结果20-24
• 3.3 胶回收DNA测序结果24-25
• 3.4 统计分析结果25-27
• 3.4.1 基础数据的比较25
• 3.4.2 各组mtDNA 4977 bp缺失率的比较25-27
• 第4章 讨论27-32
• 第5章 结论32-33
• 第6章 展望33-34
• 致谢34-35
• 参考文献35-38
• 综述38-45
• 参考文献43-45

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：365705