黄芩苷对小鼠癫痫持续状态后海马神经细胞中Kir4.1、AQP4表达的影响

发布时间：2017-04-18 20:06

  本文关键词：黄芩苷对小鼠癫痫持续状态后海马神经细胞中Kir4.1、AQP4表达的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究海人酸(kainic acid,KA)诱导小鼠癫痫持续状态(status epilepticus,SE)后及使用黄芩苷干预海马神经细胞中Kir4.1、AQP4表达的变化,并探讨黄芩苷(Baicalin,BCL)对海马神经细胞的可能保护机制。方法:体重为22-28g之间的ICR雄性小鼠60只随机分为3个组,对照组(Sham)、癫痫持续状态(SE)组、黄芩苷治疗组(100mg/kg),每组各为20只。采用侧脑室注入海人酸0.1μg(0.1μg/5μl)建立小鼠癫痫持续状态模型。待模型制作成功后,治疗组立即给予黄芩苷(100mg/kg)腹腔注射一次,12h后予同等剂量黄芩苷重复注射一次。对照组及模型组分别于癫痫发作后相应时间及12h后腹腔给予同等剂量的生理盐水注射。制模48h后,各组分别取6只小鼠脑组织行石蜡包埋切片,行HE染色观察各组海马CA3区细胞形态学的变化和免疫组化实验检测蛋白Kir4.1和AQP4的表达情况。每组各剩14只小鼠取大脑海马组织,行Western blot检测Kir4.1和AQP4蛋白的表达量。结果:①制模48h后,HE染色可见Sham组海马组织CA3区锥体细胞排列规整,形态正常,未见异型性细胞,胞质呈淡红色,胞核染成蓝色、居中,未见有凋亡、坏死细胞;SE组锥体细胞排列散乱,大量的坏死细胞,镜下可见破碎的细胞器,残留细胞有明显的异型性,有的细胞胞浆有空泡形成,有的细胞肿胀明显,胞核分布不均、固缩、边集、核仁消失等;黄芩苷治疗组镜下见有大量完整的正常细胞,在正常细胞之间分散着少数异型性细胞或胞膜破裂的坏死细胞。②免疫组化结果:1)Kir4.1:制模48小时后,镜下见对照组海马CA3区分布有少量散在被染成淡黄色的Kir4.1阳性细胞,而SE组可见排列较多,被染成棕黄色的阳性细胞,与对照组相比,二者具有统计学意义(P0.05)。与SE组相比,黄芩苷治疗组中被染成棕褐色的阳性细胞明显增多,二者差异明显(P0.05);2)AQP4:制模48小时后,高倍镜下见对照组海马CA3区可见少量散在被染成淡黄色AQP4阳性细胞,而SE组中被染成呈棕褐色的阳性细胞分布密集,与对照相比,二者具有统计学意义(P0.05)。相比较于SE组,黄芩苷治疗组中的AQP4阳性细胞分布稀疏,且染色较浅,呈棕黄色,二者差异明显(P0.05)。③Western blot结果:1)Kir4.1:对照组中Kir4.1蛋白只有微量表达,癫痫发作后海马神经细胞中Kir4.1的蛋白量有所增加(P0.05)。相对于SE组,给予黄芩苷干预后小鼠海马神经细胞中Kir4.1蛋白的表达明显增加(P0.05);2)AQP4:对照组中AQP4蛋白有少量的表达,癫痫发作后海马神经细胞中AQP4蛋白量的表达显著增加(P0.01)。与SE组相比,黄芩苷治疗组海马神经细胞中AQP4蛋白的表达量下降明显(P0.05)。这与免疫组化表达的变化相一致。结论:小鼠癫痫持续状态后海马神经细胞中Kir4.1及AQP4蛋白表达均上调,可能是神经细胞中的一种反应机制,而黄芩苷可能通过增加海马神经细胞中Kir4.1蛋白的表达及下调AQP4蛋白的表达来保护癫痫后小鼠海马神经的损伤。
【关键词】：黄芩苷 癫痫 海人酸 Kir4.1 AQP4 神经保护 炎症因子
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R742.1
【目录】：

• 英文缩略语5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 引言10-12
• 材料和方法12-23
• 1 材料12-13
• 1.1 主要仪器12
• 1.2 主要实验制剂及药品12-13
• 2 方法13-23
• 2.1 动物准备及分组13
• 2.2 SE模型制作13-14
• 2.3 行为学评分14-15
• 2.4 标本制备15
• 2.5 苏木素-伊红染色（HE染色）15-16
• 2.6 免疫组化16-18
• 2.7 Western blot检测小鼠海马神经细胞中Kir4.1、AQP4蛋白含量18-22
• 2.8 统计分析22-23
• 结果23-30
• 1 癫痫小鼠的行为学表现23
• 2 HE染色结果23-24
• 3 免疫组化结果24-27
• 3.1 黄芩苷对癫痫小鼠海马神经细胞中Kir4.1 表达的影想..2024-26
• 3.2 黄芩苷对癫痫小鼠海马神经细胞中AQP26-27
• 4表达的影想.224 Western blot蛋白免疫印迹实验结果27-30
• 4.1 Kir4.1 蛋白的表达量27-28
• 4.2 AQP4蛋白的表达量28-30
• 讨论30-32
• 结论32-33
• 参考文献33-36
• 课题总结36-37
• 文献综述37-44
• 参考文献41-44
• 致谢44

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

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本文编号：315624