卵黄抗体抑制胃内幽门螺杆菌致病作用的研究

发布时间：2018-05-29 10:54

  本文选题：幽门螺杆菌 + 培养　； 参考：《扬州大学》2008年硕士论文

【摘要】： 目前世界上感染幽门螺杆菌的人越来越多,传统的抗生素疗法由于耐药株的增多限制了它的治疗效果,寻找高效、低毒、廉价的抗幽门螺杆菌( Helicobacter pylori, H.pylori)的防治方法已经迫在眉捷。本试验以幽门螺杆菌NCTC11637为材料,采用不同培养基对H.pylori进行培养,以研究不同培养基对H.pylori生长的影响。结果表明:(1)采用固体培养H.pylori时,在微需氧条件下,培养基分别为哥伦比亚琼脂+混合抗生素+6%脱纤维山羊血,哥伦比亚琼脂+混合抗生素+6%兔血清, 37℃培养4d,均可培养出H.pylori;在严格无菌的条件下,不添加混合抗生素,培养基为哥伦比亚琼脂+6%兔血清,对细菌的生长没有影响,且不会造成杂菌污染。(2)采用液体培养H.pylori时,培养基为布氏肉汤基础加混合抗生素和6%山羊血清, H.pylori增菌迅速。菌株采取冷冻保存液法保存于- 70℃- 80℃低温条件下,可以成功复苏。 利用蒙古沙土鼠(MG)建立H.pylori NCTC11637株胃内感染模型。感染方法有两种,一种方法是MG禁食18h后用50%酒精0.5ml预处理,6h后接种H.pylori,间隔12、24h分别再次接种。另一种方法的接种方法与前述的方法相同,但接种后每日口服雷尼替丁5mg/kg体重。胃内接种H.pylori后,于第7d、15 d、35 d、45 d分别用幽门螺杆菌抗原酶联免疫法诊断试剂盒、细菌培养和胃组织切片的方法检测胃内是否已感染,观察MG胃内细菌感染情况和胃病理组织学变化。结果表明,胃内灌服酒精损伤胃粘膜与每日口服雷尼替丁相结合,在人工感染35 d后,胃内有大量H.pylori感染定植,胃组织固有层有大量炎性细胞浸润和肠化生现象。 利用蒙古沙土鼠作为实验动物,观察H.pylori特异卵黄抗体对胃内H.pylori感染的治疗效果。实验鼠间隔48h两次口服接种H.pylori(NCTC11637)布氏培养液1ml(1.15×108CFU),首次接种7 d后将实验鼠随机分为四组(15只/组),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别灌服生理盐水、复合抗菌素和抗H.pylori卵黄抗体,1次/天,连续12 d;Ⅳ组间隔48h皮下注射抗H.pylori卵黄抗体两次。在用药前实验鼠胃内均有大量H.pylori定植,感染率100%;用药后第14 d,Ⅱ组鼠的H.pylori清除率为60%;Ⅲ组、Ⅳ组鼠胃内均有少量H.pylori存在。用药25 d后,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的胃内H.pylori清除率分别为80%、60%、60%。灌服和注射抗H.pylori卵黄抗体,可以抑制沙土鼠胃内H.pylori感染,其抑制效果与抗菌素相似。 在成功研制出抗H.pylori卵黄抗体的基础上,利用蒙古沙土鼠作为实验动物,观察抗H.pylori卵黄抗体对H.pylori感染的防制作用。实验鼠分为四组(36只/组),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别灌服生理盐水、复合抗菌素和抗H.pylori卵黄抗体,连续14 d。Ⅳ组皮下注射抗H.pylori卵黄抗体,1次/天,每间隔48h后注射1次,连续预防两周。在首次用药后第8d口服接种幽门螺杆菌(NCTC11637)2.75×108CFU(布氏培养液),连续口服4 d。在接种后第23、30、45 d,Ⅰ组鼠胃内均有大量H.pylori定植,感染率100%;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组的感染率低于44%。灌服和注射抗H.pylori卵黄抗体,可以抑制沙土鼠感染H.pylori,其抑制效果与抗菌素组无明显差异(p0.05)。
[Abstract]:The results showed that : ( 1 ) Under the condition of strict aseptic condition , the medium is Columbia agar + mixed antibiotic + 6 % rabbit serum , and the culture medium is Columbia agar + 6 % rabbit serum . The culture medium is Columbia agar + 6 % rabbit serum .


Methods Two kinds of methods were established for the establishment of H . pylori NCTC11637 strain in the stomach . Two kinds of methods were used . One method was to pre - treat the gastric mucosa with 50 % alcohol for 18 h . After 6 hours inoculation , it was inoculated with H . pylori .


The effect of H . pylori - specific yolk antibody on H . pylori infection in stomach was observed by using Mongolian gerbil as an experimental animal . After 7 days of administration , H . pylori eradication rate was 80 % , 60 % and 60 % respectively in group 鈪，

本文编号：1950618