类缺血再灌注条件下Midkine因子对神经干细胞增殖、分化、凋亡的影响
本文选题:神经干细胞 + 中期因子(Midkine) ; 参考:《佳木斯大学》2008年硕士论文
【摘要】: 目的:本研究旨在观察MK对体外培养的大鼠神经干细胞的作用及类缺血再灌注条件下对神经干细胞增殖分化凋亡的影响。 方法:在体外运用细胞计数、免疫组化和免疫荧光等方法检测不同浓度Midkine对神经干细胞增殖、分化和凋亡的影响,筛选出对神经干细胞作用最大的适宜浓度。建立体外类缺血再灌注模型,运用细胞计数、免疫组化、免疫荧光等方法观察单纯神经干细胞组、适宜浓度MK干预组神经干细胞在类缺血0.5h、1h、3h、6h再灌注后对神经干细胞增殖、分化、凋亡的影响。 结果:含MK 10ng/ml的培养液为促进神经干细胞增殖、促进神经干细胞向神经元方向分化,减少细胞凋亡的最佳浓度。在类缺血再灌注后MK干预组细胞增殖率均高于单纯神经干细胞组;MK干预神经干细胞组在缺血各时间点NSE阳性细胞数均高于单纯神经干细胞组;但MK干预组神经干细胞在缺血各时间点GFAP阳性细胞数低于单纯神经干细胞组;缺血各时间点,MK干预组Caspase-3阳性细胞数少于单纯神经干细胞组。缺血时间越短这种差别越明显。 结论:1、含MK 10ng/ml的培养液为促进神经干细胞增殖、向神经元方向分化,减少凋亡的最佳浓度。 2、MK在类缺血再灌注后对神经干细胞有保护作用,可促进神经干细胞增殖、有利于向神经元元分化,并可减少细胞凋亡。
[Abstract]:Aim: to observe the effect of MK on neural stem cells (NSCs) cultured in vitro and the effects of MK on proliferation, differentiation and apoptosis of NSCs under ischemia-like reperfusion. Methods: the effects of Midkine at different concentrations on the proliferation, differentiation and apoptosis of neural stem cells were detected by cell count, immunohistochemistry and immunofluorescence in vitro, and the optimum concentration of Midkine on neural stem cells was selected. The model of in vitro ischemia-reperfusion was established, and the proliferation and differentiation of neural stem cells were observed by cell count, immunohistochemistry and immunofluorescence. The neural stem cells were proliferated and differentiated in the MK intervention group after reperfusion for 6 h or 1 hour after 0.5 h ischemia. The effect of apoptosis. Results: the culture medium containing MK 10ng/ml could promote the proliferation of neural stem cells, promote the differentiation of neural stem cells into neurons, and reduce the concentration of apoptosis. The proliferation rate of NSE positive cells in MK intervention group was higher than that in NSCs group at different time points after ischemia and reperfusion. However, the number of GFAP positive cells in MK intervention group was lower than that in pure neural stem cell group at different time points, and the number of Caspase-3 positive cells in MK intervention group was less than that in pure neural stem cell group. The shorter the ischemic time, the greater the difference. Conclusion: in order to promote the proliferation of neural stem cells, differentiate into neurons and reduce apoptosis in the culture medium containing MK 10ng/ml, MK has protective effect on neural stem cells after ischemia-reperfusion. It can promote the proliferation of neural stem cells, differentiate into neuronal cells, and reduce apoptosis.
【学位授予单位】:佳木斯大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:R329
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,本文编号:2077523
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