弓形虫ROP16 Ⅰ/Ⅲ 蛋白对小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响
发布时间：2020-12-13 06:00
目的探讨弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白对妊娠小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响。方法原代培养小鼠子宫基质细胞,用雌二醇、孕酮和cAMP体外诱导蜕膜化的同时加入ROP16重组慢病毒,72 h后qRT-PCR检测蜕膜化标志物催乳素（PRL）mRNA的表达,流式细胞术检测蜕膜细胞凋亡率的变化,并用Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平。结果提取的小鼠子宫基质细胞纯度为95%以上,在体外诱导蜕膜化后,PRL mRNA的表达随时间延长而显著升高（P<0.05）,在诱导的蜕膜细胞中过表达ROP16Ⅰ/Ⅲ,相比于对照组,蜕膜细胞的凋亡率降低（P<0.01）,凋亡蛋白Bax表达降低,Bcl-2蛋白表达上调。结论弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ蛋白会抑制蜕膜细胞的凋亡,可能会影响蜕膜细胞增殖与凋亡的平衡,从而影响胚胎的植入。
【文章来源】：安徽医科大学学报. 2019年10期 北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
小鼠子宫内膜基质细胞的鉴定×200A:荧光显微镜下观察间质细胞标志物Vimentin蛋白;B:荧光显微镜下观察DAPI染色的细胞核;C:合并观察计数波形蛋白阳性细胞数与
图4各组基质细胞感染不同ＲOP16Ⅰ/Ⅲ慢病毒的凋亡率A:ＲOP16Ⅰ/Ⅲ慢病毒转染组;B:阴性对照病毒组;C:对照组;D:各组凋亡率;与空载组比较:＊＊P＜0.01;与对照组比较:##P＜0.01图5Westernblot法检测Bax和Bcl-2表达与空载组比较:*P＜0.05;与对照组比较:#P＜0.05剧烈的增殖和分化，这种变化会逐渐延伸到整个子宫内膜。这些变化统称为子宫蜕膜化。子宫内膜进行蜕膜化的过程中，首先与子宫内膜基质细胞的正常增殖密切相关［7］。当胚泡附着在子宫内膜上皮时，在附着位置周围的内膜上皮细胞会发生凋亡，而邻近的基质细胞则会进行广泛的增殖，增殖的基质细胞获得多倍性而分化成特殊的细胞类型，此时基质细胞会向着床位点周围扩展，逐步形成成熟的蜕膜细胞，然后随着胚泡的植入，又会按照相同的趋势持续退化和凋亡［8］，并被周围的滋养层或巨噬细胞吞噬［9］。因为有了蜕膜化过程中细胞有序的增殖和退化，使胚泡周围的蜕膜细胞的数量得以控制，所以控制了滋养细胞的侵袭。在此过程中，小鼠子宫内膜基质细胞经历了形态学和分子水平的独特变化［10］。蜕膜化过程中，着床位点的蜕膜细胞停止增殖，终末分化后形成的区域称之为初级蜕膜区，第2次分化形成的区域称之为次级蜕膜区，最后次级蜕膜区的细胞也会发生凋亡，使着床位点的腔隙增大以便容纳生长的胚胎［11］。在本实验中，在孕鼠胚胎着床的时间段成功分离培养了子宫内膜基质细胞，在体外培养的小鼠子宫基质细胞中过表达ＲOP16Ⅰ/Ⅲ蛋白，并体外诱导蜕膜化时，结果显示ＲOP16Ⅰ/Ⅲ蛋白上调了蜕膜细胞Bcl-2的表达并降低了Bax表达，抑制了蜕膜?
图4各组基质细胞感染不同ＲOP16Ⅰ/Ⅲ慢病毒的凋亡率A:ＲOP16Ⅰ/Ⅲ慢病毒转染组;B:阴性对照病毒组;C:对照组;D:各组凋亡率;与空载组比较:＊＊P＜0.01;与对照组比较:##P＜0.01图5Westernblot法检测Bax和Bcl-2表达与空载组比较:*P＜0.05;与对照组比较:#P＜0.05剧烈的增殖和分化，这种变化会逐渐延伸到整个子宫内膜。这些变化统称为子宫蜕膜化。子宫内膜进行蜕膜化的过程中，首先与子宫内膜基质细胞的正常增殖密切相关［7］。当胚泡附着在子宫内膜上皮时，在附着位置周围的内膜上皮细胞会发生凋亡，而邻近的基质细胞则会进行广泛的增殖，增殖的基质细胞获得多倍性而分化成特殊的细胞类型，此时基质细胞会向着床位点周围扩展，逐步形成成熟的蜕膜细胞，然后随着胚泡的植入，又会按照相同的趋势持续退化和凋亡［8］，并被周围的滋养层或巨噬细胞吞噬［9］。因为有了蜕膜化过程中细胞有序的增殖和退化，使胚泡周围的蜕膜细胞的数量得以控制，所以控制了滋养细胞的侵袭。在此过程中，小鼠子宫内膜基质细胞经历了形态学和分子水平的独特变化［10］。蜕膜化过程中，着床位点的蜕膜细胞停止增殖，终末分化后形成的区域称之为初级蜕膜区，第2次分化形成的区域称之为次级蜕膜区，最后次级蜕膜区的细胞也会发生凋亡，使着床位点的腔隙增大以便容纳生长的胚胎［11］。在本实验中，在孕鼠胚胎着床的时间段成功分离培养了子宫内膜基质细胞，在体外培养的小鼠子宫基质细胞中过表达ＲOP16Ⅰ/Ⅲ蛋白，并体外诱导蜕膜化时，结果显示ＲOP16Ⅰ/Ⅲ蛋白上调了蜕膜细胞Bcl-2的表达并降低了Bax表达，抑制了蜕膜?
本文编号：2914038
【文章来源】：安徽医科大学学报. 2019年10期 北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
小鼠子宫内膜基质细胞的鉴定×200A:荧光显微镜下观察间质细胞标志物Vimentin蛋白;B:荧光显微镜下观察DAPI染色的细胞核;C:合并观察计数波形蛋白阳性细胞数与
图4各组基质细胞感染不同ＲOP16Ⅰ/Ⅲ慢病毒的凋亡率A:ＲOP16Ⅰ/Ⅲ慢病毒转染组;B:阴性对照病毒组;C:对照组;D:各组凋亡率;与空载组比较:＊＊P＜0.01;与对照组比较:##P＜0.01图5Westernblot法检测Bax和Bcl-2表达与空载组比较:*P＜0.05;与对照组比较:#P＜0.05剧烈的增殖和分化，这种变化会逐渐延伸到整个子宫内膜。这些变化统称为子宫蜕膜化。子宫内膜进行蜕膜化的过程中，首先与子宫内膜基质细胞的正常增殖密切相关［7］。当胚泡附着在子宫内膜上皮时，在附着位置周围的内膜上皮细胞会发生凋亡，而邻近的基质细胞则会进行广泛的增殖，增殖的基质细胞获得多倍性而分化成特殊的细胞类型，此时基质细胞会向着床位点周围扩展，逐步形成成熟的蜕膜细胞，然后随着胚泡的植入，又会按照相同的趋势持续退化和凋亡［8］，并被周围的滋养层或巨噬细胞吞噬［9］。因为有了蜕膜化过程中细胞有序的增殖和退化，使胚泡周围的蜕膜细胞的数量得以控制，所以控制了滋养细胞的侵袭。在此过程中，小鼠子宫内膜基质细胞经历了形态学和分子水平的独特变化［10］。蜕膜化过程中，着床位点的蜕膜细胞停止增殖，终末分化后形成的区域称之为初级蜕膜区，第2次分化形成的区域称之为次级蜕膜区，最后次级蜕膜区的细胞也会发生凋亡，使着床位点的腔隙增大以便容纳生长的胚胎［11］。在本实验中，在孕鼠胚胎着床的时间段成功分离培养了子宫内膜基质细胞，在体外培养的小鼠子宫基质细胞中过表达ＲOP16Ⅰ/Ⅲ蛋白，并体外诱导蜕膜化时，结果显示ＲOP16Ⅰ/Ⅲ蛋白上调了蜕膜细胞Bcl-2的表达并降低了Bax表达，抑制了蜕膜?
图4各组基质细胞感染不同ＲOP16Ⅰ/Ⅲ慢病毒的凋亡率A:ＲOP16Ⅰ/Ⅲ慢病毒转染组;B:阴性对照病毒组;C:对照组;D:各组凋亡率;与空载组比较:＊＊P＜0.01;与对照组比较:##P＜0.01图5Westernblot法检测Bax和Bcl-2表达与空载组比较:*P＜0.05;与对照组比较:#P＜0.05剧烈的增殖和分化，这种变化会逐渐延伸到整个子宫内膜。这些变化统称为子宫蜕膜化。子宫内膜进行蜕膜化的过程中，首先与子宫内膜基质细胞的正常增殖密切相关［7］。当胚泡附着在子宫内膜上皮时，在附着位置周围的内膜上皮细胞会发生凋亡，而邻近的基质细胞则会进行广泛的增殖，增殖的基质细胞获得多倍性而分化成特殊的细胞类型，此时基质细胞会向着床位点周围扩展，逐步形成成熟的蜕膜细胞，然后随着胚泡的植入，又会按照相同的趋势持续退化和凋亡［8］，并被周围的滋养层或巨噬细胞吞噬［9］。因为有了蜕膜化过程中细胞有序的增殖和退化，使胚泡周围的蜕膜细胞的数量得以控制，所以控制了滋养细胞的侵袭。在此过程中，小鼠子宫内膜基质细胞经历了形态学和分子水平的独特变化［10］。蜕膜化过程中，着床位点的蜕膜细胞停止增殖，终末分化后形成的区域称之为初级蜕膜区，第2次分化形成的区域称之为次级蜕膜区，最后次级蜕膜区的细胞也会发生凋亡，使着床位点的腔隙增大以便容纳生长的胚胎［11］。在本实验中，在孕鼠胚胎着床的时间段成功分离培养了子宫内膜基质细胞，在体外培养的小鼠子宫基质细胞中过表达ＲOP16Ⅰ/Ⅲ蛋白，并体外诱导蜕膜化时，结果显示ＲOP16Ⅰ/Ⅲ蛋白上调了蜕膜细胞Bcl-2的表达并降低了Bax表达，抑制了蜕膜?
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