甘露聚糖结合凝集素调节THP1/CD14细胞细胞因子分泌机制的初步探索

发布时间：2020-12-25 23:02

　　尽管近年来天然免疫研究进展十分迅速,但是天然免疫的本质亟待揭示和阐明。随着Janeway CA Jr等提出天然免疫通过模式识别作用启动获得性免疫应答并左右其应答类型的假说,模式识别分子成为了免疫学的研究热点之一。模式识别分子是天然免疫的重要分子,根据其存在的形式,可分为可溶性和细胞膜表面两大类。已经发现,膜相模式识别受体中Toll样受体家族（Toll-likereceptors,TLR）、巨噬细胞甘露糖受体（macrophage mannose recetor,MR）和可溶性模式识别分子中的胶凝素（collectins）家族成员肺表面活性物质脱辅基蛋白A和D（surfactant protein A、surfactant protein D,SP-A、SP-D）等是连接天然免疫与获得性免疫的桥梁。天然免疫模式识别作用正直逼免疫应答的核心问题——应答的启动及其调控。甘露聚糖结合凝集素（mannan-binding lectin,MBL）与SP-A、SP-D同属于胶凝素家族,主要由肝细胞分泌,作为糖蛋白存在于血浆中。MBL的一级结构至高级结构均与补体分子C1q高度同源。MBL的主要功能区有... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

·2Clq或抗ClqR单克隆抗体不能抑制MBL与THpl/CD14细胞结合Fig·2·2Clqoranti·ClqRmAbcan’tinhibitthebindingofMBLtoTHPI/CD14cells

己。:写吸卜JodO笆.u﹄山产了/厂Z/了/图2一l糖对MBL与THPI/CD14细胞结合的影响Fig·2· 1TheinnueneeofcarbohydratesinthebindingofMBLtoTHPI/CD14eells *P<0.05vseonrrolgrouP叁昌ABQ幻护功已.6孚八肠O宁﹄尹侣.勺」分了l、凳丁店I‘，丛。了…，lf、帕，护仙’ !r10，!O‘氏‘礴I‘..’护川1日”‘祝图2· 2Clq或抗ClqR单克隆抗体不能抑制MBL与THpl/CD14细胞结合Fig·2· 2Clqoranti· ClqRmAbcan’ tinhibitthebindingofMBLtoTHPI/CD14cells A:PreineubationwithClq(30mg/L):B:PreincubationWithanti一 ClqRPmAb(30mg/L); grayshadow:unmarkedMBL:dashline:FITC一 MBL;solidline:inhibitorsandFITC一MBL 2.2.5MBL结构域蛋白可部分抑制MBL与 THPI/CD14细胞结合单独预加;hMBLCRD蛋白或thMBLCLR蛋白都能部分抑制MBL’，THPI/CD14细胞结合，而联合应用rhMBL-CRD蛋白和:hMBL一CLR蛋自贝IJ，J丁完全抑制MBL与 THPI/CD14细胞的结合(图2一3)?

201052.51.250.63C皿eenti加 tionofhIBL(朔嗯拼L)图3一 5Cell一ELISA分析:TLR-2对MBL与LPS刺激的THPllCD14细胞的结合的抑制Fig·3一 5AnalysisoftheinflueneeofsTLR一 2tothebindingofMBLtoLPSstimulated THPllCD14byCell一ELISA200口如100.师7石.如50日如2石口如10日如图3七LPS增强THHICD14细胞 TLR-2TLR礴mRNA的表达Fig.3一 LPSenhaneedtheexp邝 ssionofTLR一 2andTLR-4mRNAonTHPllCD14hyRT-PCR- M:DNAmarker:l一3:TLR一2mRNA’.l:no一 LPS:2:LPSZh:3:LPS24h:4场:TLR一4m朋A.4:non一 Lps;5:LpsZh:6:Lps24h;7:9:p一 actinmRNA·7:non一 Lps:8:LpsZh:9:Lps24h 3.2.4MBL抑制LPS刺激的THPI/CD14细胞Nr一比的转位 westemboh结果显示，在转移了核蛋白的PvD膜上，细胞对照组仅能见到极浅的目的蛋白条带，LPS刺激组(培养液中加入100林g/L的LPS，培养 60min)蛋白条带明显增粗，MBL组(培养液中加入100林g/L的LPs与10m叭MBL，培养 60min)蛋白条带有所减弱(图3一7)

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：2938546