miR-222及miR-424/424 + 表达上调对心脏发育的影响及机制研究

发布时间：2020-12-25 22:47

　　miRNA是生物体内一类长度约为22个核苷酸的非编码小RNA。在miRNA加工成熟的过程中,大多数情况下,miRNA双链中只有一条链会保留下来,参与形成RNA诱导的沉默复合体（RISC）。有时niRNA双链的两条链会被同时保留下来发挥生物学功能,一条成熟体称作miRNA,另一条被称作miRNA-star。成熟的miRNA与靶基因3’UTR区形成不完全的配对抑制翻译过程,或形成接近完全的配对导致靶基因mRNA降解。一个miRNA可能调控多个基因的表达,一个基因也可能受几个miRNA的调控,因此miRNA的调控形成的网络具有复杂性和广泛性。心脏作为脊椎动物胚胎发育的过程中第一个形成并发挥功能的器官,其发育的每个阶段都受到重要基因和信号通路的调控。目前已有多篇文献报道miRNA对于心肌细胞的增殖、迁移、分化以及心脏的发育成熟等生理活动具有重要影响。多个研究证实,miRNA在先天性心脏病、心肌肥厚及心力衰竭等成年型心脏病病理过程中发挥着重要的作用。在本课题组前期实验中,使用Affymetrix GeneChip miRNA Array芯片对收集的法洛氏四联症及正常人心肌组织进行miRNA筛选,... 

【文章来源】：复旦大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１：?ｍｉＲ－２２２在斑马鱼不同发育时期及成鱼不同器官中表达情况检测

在斑马鱼中的上调情况。实验结果显示，注射２５０ｐｇ?ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２组斑马鱼??ｍｉＲ－２２２表达比对照组上调３倍；注射５０雌ｇ?ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２组斑马鱼ｍ化－２２２表??达比对照组上调５倍（图２－Ａ？Ｂ）??Ａ??．／／?．／?／??ｍｉＲ－２２２??Ｂ?７?１?＊??６?．??Ｖ??Ｉ?５．?１—＾??呂??ｓ?４?■?。，??？?＊?＃?－．Ｖ：－??＾?３?．???ＢＲＣ．??＞?□ｐｒｃ－ｎｉｉＲ－２２２??请２?？??：■麵?Ｍ??Ｕ?Ｉ?■?■?，?■?ｎ－Ｔ￣ｒ—?，??。卢?與４??图２：?Ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２可显著上调斑马鱼体内加Ｒ－２２２的表达。（Ａ）；半定量??ＲＴ－ＰＣ民检测注射２５０ｐｇ和５００ｐｇ?ｐｒｃ－ｎｉｉ艮－２２２组斑马鱼ｍｉＲ－２２２表达情况。（Ｂ）：??实时癸光定量ＰＣＲ检测注射２５０ｐｇ和５０雌ｇ?ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２组斑马鱼ｍｉＲ－２２２表达??情况。＊代表Ｐ＜〇，〇５，＊＊代表ＰＯ．Ｏｌ。??２７??

上调组在解剖学显微镜下未观察异常表型。但是从２４?ｈｐｆ左右，斑马鱼胚胎的整??体形态出现也脏孺动速度缓慢，发育较迟缓的现象。??注射ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２后４８ｈｐｆ，?ｍｉＲ－２２２上调的斑马鱼也脏与对照组（图３－ａ和??图３－ｄ）相比，斑马鱼整体形态未有显著差别（图３－ｂ和图３－Ｃ）。一部分斑马鱼??屯、脏搏动无力，形态呈线状（图３－ｅ）。另一部分斑马鱼出现屯、房异常膨大，也包??水肿的现象（图３－ｆ）。同时，ｍｉＲ－２２２上调组伴随有卵黄囊较大，血流减缓，红??细胞减少等现象，也率由正常的（１４２?＋?８）次／ｍｉｎ减少为（８０?＋?２巧次／ｍｉｎ。??：隣??Ｋ．Ｃ．?＊ｔｃ．??Ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２?Ｐｒｅ－ｍｉＲ－２２２??Ｐｒ＾ｍｍ－２２２?…??图３；?ｍｉＲ－２２２表达上调后４８ｈｐｆ斑马鱼必脏表型异常。（ａ、ｄ）：对照组斑??马鱼。（ｂ、Ｃ、ｅ、ｆ）：?ｍｉＲ－２２２上调组斑马鱼。??２８??


本文编号：2938523