国内分离的致肾盂肾炎大肠埃希菌papA和papG基因分型的研究

发布时间：2020-12-25 19:22

　　尿路感染是一种常见病、多发病，大肠埃希菌为其主要致病菌，导致上行性尿路感染的大肠埃希菌大多具有P菌毛，称为致肾盂肾炎大肠埃希菌（UPEC）。编码P菌毛的粘附基因群（pap）位于UPEC的染色体上，由11个基因组成，其中papA编码P菌毛的主要菌毛结构亚单位，papG编码P菌毛尖端与尿道上皮细胞表面受体Gal-Gal结合的真正粘附素。近年来，UPEC papA和papG因在P菌毛组成和粘附致病中的重要作用而成为研究的焦点，尤其对papA和papG的基因分型研究在UPEC的流行病学、致病机理、遗传变异和免疫防治研究中的作用在国外越来越引起人们的关注，国内尚处于空白。 首先，本研究建立了UPEC papC PCR的方法，在其扩增片段内设计了PstⅠ内切酶位点，可用于PCR产物的鉴定，提高该方法的特异性。采用上述方法对国内分离的147株尿源性大肠埃希菌进行检测，UPEC菌株检出率为31.98％（47／147株）。与血凝试验相比较，两种方法检测结果无明显差异（P＞0.05）。继而采用多重PCR方法对45株UPEC菌株分别进行了papA和papG的基因分型，探讨国内UPEC菌株的papA和p... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：117 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

成熟P菌毛的各亚单位组装模示图

图2.IA、B、c三个PcR组引物组成及扩增片段大小示意图2.3.3反应体系:IOX扩增缓冲液5pl，MgC123nunol/LdNTPZOOpmol/L，primerpoolA、B、C内5种引物各ZOpmol，模板DNA质粒DNA/细菌染色体DNA，加DDW至50pl，混合加入TaqDNA聚合酶4U和石蜡油30pl，离心IOSee.2.3.4反应条件:94oC变性IOmin94’Clmin，62℃lmin，72aClmin10see，3个循环94oClmin，67oClmin，72aCI.5min25个循环72’C延伸IOmin.

结果重PCR扩增结果色体DNA为模板，应用paPG基因片段。I型papG阳性对照菌株U11型papG阳性对照菌株UPEC132对照菌株E.coliK一12P678一54株p即G扩增产物电泳结果证明全部UPECpapGPCR扩增阳性率为101234

【参考文献】：
期刊论文
[1]致肾盂肾炎大肠杆菌粘附素papG基因克隆及序列分析[J]. 郑铃,陈锦英,陈贻锴,詹丽钦.  中国人兽共患病杂志. 2002(03)
[2]用PCR法检测致肾盂肾炎大肠杆菌papA基因[J]. 陈锦英,李方涛,康宁,李宝艳.  天津医药. 2001(03)
[3]致肾盂肾炎大肠杆菌papA基因的克隆及序列分析[J]. 陈锦英,康宁,李方涛.  中华微生物学和免疫学杂志. 2000(03)
[4]致肾盂肾炎大肠杆菌粘附特性的研究[J]. 陈锦英,杨惠彬,何建民,苏琦华.  微生物学通报. 1995(01)
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本文编号：2938248