肠道派氏结嗜酸性粒细胞亚群的发现及其黏膜免疫调控功能与机制的研究

发布时间：2024-06-12 05:33

　　背景和立题依据：由病原微生物感染引起的传染病是人类健康和生命的主要威胁之一。目前发现,90%以上的人类传染病经由黏膜途径感染。然而,黏膜抗感染免疫机制至今不明。黏膜抗感染免疫不同于系统免疫,与系统免疫系统相比,黏膜处于一个长期带菌的环境,接触不同来源和性质的抗原,这就要求黏膜免疫系统对有害抗原和无害抗原具有区别能力,并反馈为不同的免疫反应。对于食物,正常菌群等无害抗原,肠道黏膜免疫系统表现为免疫耐受,避免发生超敏反应和自身免疫性疾病,而与无害抗原相反,肠道内的病原体等有害抗原可以被肠道黏膜免疫系统识别,并引起免疫应答。然而,黏膜免疫的机制至今不明。肠道黏膜免疫系统是机体免疫系统中最大也是最为复杂的部分,也最具有代表性。大量研究数据揭示,肠道黏膜免疫系统的免疫耐受机制主要有调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)介导,而诱导性Treg的产生与肠道黏膜微环境密不可分,这种特殊联系来源于肠道黏膜免疫系统的几种细胞或细胞亚群分泌的维甲酸。上述资料提示,肠道具有分泌维甲酸能力的细胞或细胞亚群可能在肠道免疫耐受机制中发挥了重要作用。 研究内容及意义：本文通过研究肠道派氏结中不...

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【学位级别】：博士

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致谢
前言
中文摘要
Abstract
英文缩写词表
第一章 引言
    1.1 黏膜免疫
    1.2 肠道黏膜免疫系统和调节性T细胞
    1.3 维甲酸
    1.4 论文研究内容及目的
    1.5 本论文创新之处
第二章 肠道派氏结中发现一群分泌高浓度维甲酸的嗜酸性粒细胞
    2.1 材料及方法
        2.1.1 试剂及仪器
        2.1.2 实验动物
        2.1.3 分离派氏结中CD11c⁺细胞
        2.1.4 检测派氏结中CD11c⁺细胞中各亚群细胞的醛脱氢酶活性
        2.1.5 检测派氏结CD11c⁺CD11b^hi CD8^-亚群细胞表面相关分化抗原和蛋白的表达
        2.1.6 派氏结CD11c⁺CD11b^hi CD8^-细胞瑞氏染色
        2.1.7 分离PP-Eos
        2.1.8 维甲酸液相色谱的分析和建立
        2.1.9 液相色谱-质谱联用检测肠道派氏结嗜酸性细胞维甲酸
    2.2 实验结果
        2.2.1 肠道派氏结CD11c⁺细胞中,发现一群高表达醛脱氢酶活性的细胞
        2.2.2 派氏结中高表达醛脱氢酶活性的CD11c⁺CD11^hi CD8^-亚群细胞是嗜酸性粒细胞(Peyer's patches eosinophils,PP-Eos)
        2.2.3 肠道派氏结嗜酸性细胞分泌高浓度维甲酸
    2.3 讨论
第三章 PP-Eos分泌低浓度Treg诱导因子(TGF-β1和IL-2)
    3.1 材料及方法
        3.1.1 试剂及仪器
        3.1.2 实验动物
        3.1.3 分离派氏结中CD11c⁺细胞
        3.1.4 双抗体夹心ELISA法测定肠道派氏结嗜酸性细胞培养上清中TGF-P与IL-2的浓度
    3.2 实验结果肠道派氏结嗜酸性细胞分泌低浓度TGF-β1与IL-2
    3.3 讨论
第四章 PP-Eos诱导Treg(CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺细胞)分化
    4.1 材料及方法
        4.1.1 试剂及仪器
        4.1.2 实验动物
        4.1.3 分离肠道派氏结嗜酸性细胞
        4.1.4 分离初始型T细胞
        4.1.5 肠道派氏结嗜酸性细胞与初始型T细胞共培养
        4.1.6 Treg检测试剂盒检测共培养上清中CD25和Foxp3双阳性Treg
        4.1.7 双抗体夹心ELISA法测定共培养上清中TGF-β,IL-4,IL-17与IFN-γ的浓度
    4.2 实验结果
        4.2.1 PP-Eos诱导初始型T细胞向Treg方向分化
        4.2.2 PP-Eos抑制初始型T细胞向Th1和Th17方向分化
    4.3 讨论
第五章 外周血Eos的表型,维甲酸分泌以及对初始型T细胞分化方向的影响
    5.1 材料及方法
        5.1.1 试剂及仪器
        5.1.2 实验动物
        5.1.3 分离外周血嗜酸性粒细胞
        5.1.4 流式检测外周血嗜酸性粒细胞表型
        5.1.5 流式检测外周血嗜酸性粒细胞醛脱氢酶活性
        5.1.6 液质联用检测外周血嗜酸性粒细胞的维甲酸分泌
        5.1.7 Treg检测试剂盒检测外周血嗜酸性粒细胞和初始型T细胞共培养上清中CD25和Foxp3双阳性Treg
    5.2 实验结果
        5.2.1 外周血嗜酸性粒细胞表型
        5.2.2 外周血嗜酸性粒细胞的维甲酸分泌
        5.2.3 外周血嗜酸性粒细胞对T细胞Treg分化方向的影响
    5.3 讨论
6 综述
参考文献
附录
作者简历与攻读学位期间取得的科研成果



本文编号：3993298