小鼠睾丸生殖细胞凋亡及相关基因调控的研究

发布时间：2021-01-10 23:06

　　越来越多的证据表明：细胞凋亡是精子发生过程中生精细胞主动退化的机制，而激素、温度等都是生精细胞凋亡的重要调节因素。但是，这些细胞外的调节因素，必须激活生精细胞内部某些基因的转录、表达，才能诱导细胞这种主动自杀行为。目前，虽然生精细胞凋亡的研究已成为一个热点，但从基因水平上研究生精细胞凋亡的报道还比较少。本实验的研究目的，即是想通过在体和离体的实验，探讨细胞凋亡的重要调节基因bcl-2、bax及hsp70基因是否参与生精细胞凋亡的调节以及怎样调节生精细胞凋亡，为更深入地探索生精细胞主动退化的分子机制提供一些基础理论和实验依据。 首先，我们通过将成年小鼠的睾丸推入腹腔，然后缝合单侧腹股沟管的方式，建立了体内实验隐睾诱导生精细胞凋亡的模型。结果发现：隐睾术后6-15d，术侧睾丸重量明显下降，与对照例有显著差异（P＜0.01）。组织学观察显示：术后6-15d，一些生精细胞剥脱至管腔，生精上皮变薄不完整，空化现象明显，大量生精细胞丢失，成熟精子明显减少甚至消失，一部分生精细胞的核染色质浓缩，明显边集化，呈环状，出现典型的细胞凋亡特征。管腔中出现“多核巨细胞”（Multinucleated ... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：107 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

对照及实验隐辛组织切片HE染色，、200FigZ:PhotomieorgraPhofserotalnadehryPtocrhidismtestisseetions，H&Estainx200A:SerotaltestisC:CyrPtorehidtestisofsdB:CyrPtorehidtestisof6dD:CyrPtoerhidtestisoof1od

Fig4(D)图4:辛丸组织切片的TUNELg4:Tl刀，ELstainingoftesticulartissuesections·fluoreseenee.xZOOA:SerotaltestisC:CyrPtocrhidtestisofsd染色，x200PositivestainingPaPearsgerenB:CyrPtoerhidtestisof6dD:CryPtorehidtestisof1od

为2士1.37(2)细胞凋亡百分比结果显示实验组比对照组凋亡细胞数明显增加(图7)，41℃培养30mni和hl之间也有显著差异(P<0.05)表6培养细胞凋亡百分比Table6PereentageofaPoPtotieseParatedeultureeell33，C培养41℃培养30min41℃培养lh精原细胞个别7.8士2.320.6土9.4#精母细胞<2%17.4士8.731.3士11.2#，精子细胞个别15.8土.782.64士9.1##P<0.05VS41，C培养30min五、DNA凝胶电泳l、组织DNA凝胶电泳隐辛术后6、8、10d可见“DNAladder，，图谱，显示有DNA断裂的小片段存在，而相应的对照侧、隐辛术后d3及正常小鼠辜丸没有观察到小片断DNA(图8).2、细胞DNA凝胶电泳混合细胞加温培养30min，lh后

【参考文献】：
期刊论文
[1]睾丸生殖细胞凋亡的调控研究进展[J]. 朱海东.  生殖医学杂志. 1997(01)
[2]程序化细胞死亡与肿瘤[J]. 方敏,薛绍白.  基础医学与临床. 1994(03)



本文编号：2969584