人促血液血管生成素的克

发布时间：2021-01-13 19:59

　　人促血液血管生成素（Hemangiopoietin，HAPO）最初是从再生障碍性贫血病人的尿中分离鉴定出的对巨核细胞增殖有促进作用的蛋白。在它的氨基末端有两个富含半胱氨酸的促细胞生成素B同源区（Somatomedin BHomology，SMB）和一个肝素结合区。用已知HAPO序列到基因库中作同源性分析（BLAST），发现与蛋白多糖4（Proteoglycan 4，PRG4）同源性很高。文献推测HAPO和关节软骨浅表层蛋白（Articular cartilage superficial zone protein，SZP）都为蛋白多糖4的不同的剪接体，其基因的染色体定位在1q24-25。实验中发现，它对血液干／祖细胞和血管内皮细胞均有促增殖的作用，具体的作用机制目前还不十分清楚。 为了进一步研究HAPO的生物学功能，我们以RT-PCR方法，从人的胎肝细胞的总RNA中扩增出HAPO的cDNA。经测序证实后插入融合表达载体pET32c中，并实现在大肠杆菌BL21（DE3）中的可溶性表达，再经DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱、Ni-Chelating Seph... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

19.HAPO的染色体定位MaPofHAPO

HAPO多克隆抗体检测的双扩图

图3.2DEAE离子柱层析后SDS.PAGE图ig.3.2SDS一PAGEnaalysisofht一HAPOer;2，TotalPorteinofE.Coli;3.4.UnbindingPortionPekaeontainedufsionPortein:7.otherelutionngSepharoseFF柱层析达的融合HAPO的硫氧还蛋白的后面含有应用了亲和柱一镍柱，镍柱的结果见图杂蛋白，12OMm咪啤洗脱下了含目的4)表明蛋白得到了进一步的纯化。由于形洗脱不能应用，可用不同的咪哇浓度

【参考文献】：
期刊论文
[1]人内皮抑素在毕赤酵母中的表达、纯化与生物功能研究[J]. 冯怡,崔立斌,刘传暄,马清钧.  生物工程学报. 2001(03)
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本文编号：2975476