构建基于胞质分裂相关基因表达变化的新型心肌细胞增殖评估体系

发布时间：2021-02-09 01:04

　　完整的细胞有丝分裂（Cell Division）过程是指细胞重新进入细胞周期（Cell Cycle）,历经DNA复制（DNA Replication）、细胞核分裂（Caryokinesis）和细胞质分裂（Cytokinesis）这些重要阶段。但是,哺乳动物在出生后早期心肌细胞就丧失了有效的胞质分裂过程,最终导致成年个体50%以上的心肌细胞呈双核状态。心肌细胞仅停滞在胞核分裂阶段而不进入胞质分裂的现象为准确评估心肌再生能力带来了困难。既往评估心肌细胞增殖的一些指标如Ki67、Brdu （5-Bromo-2-deoxyUridine）、 PCNA （Proliferating cell nuclear antigen）和H3P （Phosphorylated histone H3）等主要是针对DNA复制和核分裂过程,不能客观地反映心肌细胞是否发生了胞质分裂过程。因此,探索精确有效的心肌细胞增殖评估方法是心脏再生研究的重要方向之一。近期的研究指出细胞周期相关基因评分（Cell Cycle Progression Score, CCP-Score）能够准确评价各种肿瘤细胞的增殖情况,从而有效判... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：103 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语表
引言
    参考文献
第一部分：胞质分裂基因评分（CC-Score）系统的建立
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验细胞和实验动物
        2.2 主要实验试剂
        2.3 主要试剂配制方法
        2.4 主要实验设备
        2.5 实验方法
    3 结果
        3.1 胞质分裂相关基因在不同增殖状态下的心肌细胞的表达变化
        3.2 CC-Score对于不同增殖状态下的心肌细胞增殖情况的评价
        3.3 MTT和Brdu法对心肌细胞增殖情况的评价
        3.4 利用血管紧张素Ⅱ和内皮素Ⅰ对心肌细胞肥大模型的构建
        3.5 细胞免疫荧光染色法对心肌细胞增殖情况的评价
        3.6 流式细胞周期检测对于心肌细胞增殖情况的评价
    4 讨论
    5 结论
    参考文献
第二部分：CC-Score能有效区分H9C2心肌细胞DNA复制、核分裂及完全的细胞分裂
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验动物
        2.2 主要实验试剂
        2.3 主要试剂配制方法
        2.4 主要实验设备
        2.5 实验方法
    3 结果
        3.1 胞质分裂相关基因在不同分裂状态心肌细胞的表达变化
        3.2 CC-Score对不同分裂状态心肌细胞的区分
        3.3 MTT法和Brdu法对不同分裂状态心肌细胞的区分
        3.4 细胞免疫荧光染色法对不同分裂状态心肌细胞的区分
        3.5 流式免疫抗体法对不同分裂状态心肌细胞的区分
        3.6 流式细胞周期检测对不同分裂状态心肌细胞的区分
    4 讨论
    5 结论
    参考文献
第三部分：应用CC-Score评估小鼠出生后心肌再生能力的变化
    1 前言
    2 材料与方法
        2.1 实验动物
        2.2 主要实验试剂
        2.3 主要试剂配制方法
        2.4 主要实验设备
        2.5 实验方法
    3 结果
        3.1 胞质分裂相关基因在乳鼠心脏组织的表达变化情况
        3.2 细胞周期进程相关基因在乳鼠心脏组织的表达变化情况
        3.3 CC-Score对在乳鼠心脏再生增殖情况的评价
        3.4 CCP-Score对乳鼠心脏再生增殖情况的评价
        3.5 免疫荧光染色法对乳鼠心脏再生增殖情况的评价
    4 讨论
    5 结论
    参考文献
文献综述
    参考文献
附录
致谢



本文编号：3024789