高铁应激对小鼠成肌细胞C2C12线粒体自噬和凋亡的影响

发布时间：2021-02-10 05:31

　　目的 观察高铁培养环境下小鼠成肌细胞C2C12生物学活性指标的变化,探讨高铁应激对骨骼肌细胞生物学活性的影响和相关机制。方法 体外培养小鼠成肌细胞C2C12,在马血清诱导作用下分化为骨骼肌细胞,以不同浓度（50、100、200 μmol/L）枸橼酸铁铵（FAC）干预,细胞计数试剂盒（CCK-8）检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率,活性氧（ROS）检测试剂盒检测细胞内ROS水平,线粒体荧光探针标记线粒体,流式细胞仪检测细胞内线粒体相对含量,Western blot法检测细胞内自噬相关蛋白轻链蛋白3Ⅰ、Ⅱ（LC3Ⅰ、LC3Ⅱ）、B淋巴细胞瘤2/腺病毒相互作用蛋白3及其同族体（BNIP3、BNIP3L）的表达；Western blot法分别检测细胞色素C（Cyt C）在细胞质和线粒体内的表达,使用抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC 2.5 mmol/L）和FAC共同干预,再次检测细胞的增殖、凋亡指标。结果 C2C12细胞在FAC干预后,细胞的增殖活性随FAC干预浓度增加呈浓度依赖性下降（P<0.01）,凋亡率呈浓度依赖性升高（P<0.01）；ROS水平呈浓度依赖性升高（P<... 

【文章来源】：中华实验外科杂志. 2019,(01)

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本文编号：3026863