抗菌肽hCAP-18/LL-37基因转染对巨噬细胞RAW264.7活化功能的影响
发布时间：2021-02-12 00:07
采用分子生物学与免疫学技术,研究人源阳离子抗菌肽hCAP-18/LL-37基因转染对M1型巨噬细胞RAW264.7细胞活化功能的影响及其机理。采用脂质体转染的方法将本实验室已构建的重组质粒pcDNA4/Myc-His-LL-37瞬时转染至RAW264.7细胞,RT-PCR法检测其转染情况;MTT法检测RAW264.7细胞的增殖活性;流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡变化;中性红吞噬实验检测RAW264.7吞噬功能;RT-PCR法分析CD80、CD86与TLR及细胞因子的mRNA的表达。结果表明:hCAP-18/LL-37基因成功转染RAW264.7细胞;hCAP-18/LL-37基因转染可促进LPS处理的RAW264.7细胞的增殖活性;hCAP-18/LL-37基因转染后RAW264.7细胞未出现明显的凋亡和细胞周期的改变;中性红吞噬实验结果表明: LPS处理的RAW264.7细胞吞噬功能与未处理组比较显著增强,经LPS处理的重组载体转染组与空载体转染组比较吞噬功能增强;RT-PCR结果表明:hCAP-18/LL-37基因转染可促进RAW264.7细胞CD80和CD86的mRNA表达,促...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
MTT比色法检测细胞的增殖活性Fig.2.3DetectionofcellproliferationindifferentgroupsbyMTTmethod24h48h72htime
cell 0.31±0.012**4 transfected cell 0.24±0.012ansfected cell 0.39±0.051*#sfected cell compared with LPS+ PcDNA4 transfected cell*ell compared with Untransfected cells control **P﹤0.05sfected cell compared with LL-37 transfected cell #P﹤0.05LL-37 基因转染对 RAW264.7 细胞 CD80、CD8-1β 的 mRNA 表达的影响显示:hCAP-18/LL-37基因转染组与空载体转染CD80、CD86 mRNA的表达均上调。经过LPS（趋势不大。1 2 3 4 5 6 7
RT-PCR 结果显示：LPS 处理前后，重组载体转染TLR4 的 mRNA 的表达上调。LR-4actin图 2.11RT-PCR 检测细胞 TLR4mRNA 的表达.2.11 Detection the expression of TLR4 mRNA by R，TNF-α的RT-PCR结果显示：hCAP-18/LL-37基转染组比较IL-1β，TNF-α的mRNA表达都上调，理后，变化趋势不大。1 2 3 4 5 6 71 2 3 4 5 6 7
【参考文献】：
期刊论文
[1]昆虫抗菌肽在医药上的应用[J]. 黄自然,廖富蘋,郑青,黄亚东. 天然产物研究与开发. 2001(02)
[2]昆虫抗菌肽的功能、作用机理与分子生物学研究最新进展[J]. 赵东红,戴祝英,周开亚. 生物工程进展. 1999(05)
[3]人工合成杀菌肽shiva-1对人直肠癌细胞株的杀伤作用[J]. 张卫民,黄自然,程挺干,彭朝晖. 中华消化杂志. 1998(05)
本文编号：3029928
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：47 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
MTT比色法检测细胞的增殖活性Fig.2.3DetectionofcellproliferationindifferentgroupsbyMTTmethod24h48h72htime
cell 0.31±0.012**4 transfected cell 0.24±0.012ansfected cell 0.39±0.051*#sfected cell compared with LPS+ PcDNA4 transfected cell*ell compared with Untransfected cells control **P﹤0.05sfected cell compared with LL-37 transfected cell #P﹤0.05LL-37 基因转染对 RAW264.7 细胞 CD80、CD8-1β 的 mRNA 表达的影响显示:hCAP-18/LL-37基因转染组与空载体转染CD80、CD86 mRNA的表达均上调。经过LPS（趋势不大。1 2 3 4 5 6 7
RT-PCR 结果显示：LPS 处理前后，重组载体转染TLR4 的 mRNA 的表达上调。LR-4actin图 2.11RT-PCR 检测细胞 TLR4mRNA 的表达.2.11 Detection the expression of TLR4 mRNA by R，TNF-α的RT-PCR结果显示：hCAP-18/LL-37基转染组比较IL-1β，TNF-α的mRNA表达都上调，理后，变化趋势不大。1 2 3 4 5 6 71 2 3 4 5 6 7
【参考文献】：
期刊论文
[1]昆虫抗菌肽在医药上的应用[J]. 黄自然,廖富蘋,郑青,黄亚东. 天然产物研究与开发. 2001(02)
[2]昆虫抗菌肽的功能、作用机理与分子生物学研究最新进展[J]. 赵东红,戴祝英,周开亚. 生物工程进展. 1999(05)
[3]人工合成杀菌肽shiva-1对人直肠癌细胞株的杀伤作用[J]. 张卫民,黄自然,程挺干,彭朝晖. 中华消化杂志. 1998(05)
本文编号：3029928
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/shiyanyixue/3029928.html
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