PTEN敲除小鼠前列腺癌模型的蛋白组学分析靶基因Chop的确定及诱导性表达c-myc细胞系的建立

发布时间：2021-02-19 23:51

　　一、PTEN敲除小鼠前列腺癌模型的蛋白组学分析目的：通过高通量的质谱技术以及SILAC精确的计量技术,使蛋白组学能够应用于前列腺癌蛋白质组的系统分析,明确在肿瘤进程中有意义的蛋白指标。方法：使用精氨酸10、赖氨酸8标记的SILAC培养液对PTEN敲除小鼠前列腺癌细胞株进行培养。RIPA液对细胞进行裂解。正常组织、肿瘤标本的石蜡切片及小鼠前列腺癌细胞系提取蛋白,胰蛋白酶消化,肽链的分离及液相质谱分析,软件数据分析。结果：数据分析最终得到约2000种蛋白。其中肿瘤标本中明显上调蛋白占264种,明显下调蛋白303种。PTEN敲除标本中有关细胞粘附的蛋白表达上调（胶原蛋白、层粘连蛋白、整合素…）；有关蛋白质运输（RAB）上调；调节细胞周期的部分蛋白下调（MAPK7、胞裂蛋白及组蛋白）,有关未折叠蛋白反应中的一系列基因下调。结论：利用SILAC技术的定量蛋白组学研究能够精确地对比肿瘤组织与正常组织之间的蛋白水平差异,能够更好地了解前列腺癌进展的分子生物学机制,为前列腺癌早期的生物学标志物的筛选、寻找有效地靶向治疗基因及对于前列腺癌治疗效果进行有效的监测建立了良好的基础。二、抑制PTEN表达后前列... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：96 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、PTEN敲除小鼠前列腺癌模型的蛋白组学分析
    1.1 对象和方法
        1.1.1 材料
        1.1.2 实验方法
        1.1.3 数据分析结果
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、沉默或抑制PTEN基因对前列腺癌细胞生长和凋亡的影响
    2.1 对象和方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 实验方法
        2.1.3 统计学分析
    2.2 结果
        2.2.1 MTT 结果
        2.2.2 流式细胞仪检测22Rv1转染siRNA PTEN后细胞凋亡
        2.2.3 PTEN及Chop的mRNA表达水平
        2.2.4 PTEN及Chop的蛋白表达水平
    2.3 讨论
    2.4 小结
三、Chop基因对前列腺癌细胞生长和凋亡的影响
    3.1 对象和方法
        3.1.1 材料
        3.1.2 实验方法
    3.2 结果
        3.2.1 22Rvl细胞Chop基因抑制、Chop基因过表达时MTT检测结果
        3.2.2 流式细胞仪检测22Rvl抑制、过表达Chop基因后细胞调亡率变化
        3.2.3 检测抑制Chop基因抑制及过表达时下游基因的蛋白表达水平变化情况.
    3.3 讨论
    3.4 小结
四、构建出可诱导表达c-myc基因的22Rv1细胞系
    4.1 对象和方法
        4.1.1 材料
        4.1.2 实验方法
        4.1.3 统计学分析
    4.2 结果
        4.2.1 基因测序结果
    4.3 讨论
    4.4 小结
结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    PTEN与UPR在前列腺癌中表达相关性及意义
    c-myc基因在前列腺癌中的意义与四环素诱导表达系统
    综述参考文献
致谢



本文编号：3041886