细粒棘球蚴重组蛋白EgG1Y162-2诱导表达条件的优化及其蛋白结构预测

发布时间：2021-02-24 07:49

　　目的优化探索重组质粒pET30a-EgG1Y162-2蛋白表达条件并预测其蛋白结构模型。方法将构建的重组质粒pET30a-EgG1Y162-2转化至E.coli BL21 （DE3）菌株中,用不同浓度的IPTG进行不同时间段的蛋白诱导表达,诱导后的菌液超声破碎、离心,分别取上清和沉淀用SDS-PAGE分析重组蛋白EgG1Y162-2的表达情况,Western blot鉴定表达蛋白的反应原性。采用在线SWISS MODEL预测EgG1Y162-2蛋白的三维结构。结果 EgG1Y162-2蛋白在37℃,IPTG终浓度为0.5 mmol/L,诱导4 h条件下的表达量较高,蛋白相对分子质量约为15×10³,与预期相符,且能被鼠抗His-Tag抗体识别。在线Swiss-model预测EgG1Y162-2-2蛋白3D结构模型,与4Ixo.1.A结构的相似度为37.71%。结论优化的重组蛋白EgG1Y162-2表达最优条件预测的该蛋白三维结构,为细粒棘球蚴疫苗EgG1Y162-2抗原的功能研究奠定了基础。 

【文章来源】：中国病原生物学杂志. 2019,14(09)北大核心

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 方法
        2.1 重组EgG1Y162-2的诱导表达条件的优化
        2.2 重组蛋白Western blot鉴定
        2.3 重组蛋白的信息学软件分析
结 果
    1 pET30a-EgG1Y162-2表达产物的SDS-PAGE电泳分析
    2 不同诱导条件下的重组蛋白表达水平
    3 重组蛋白EgG1Y162-2的Western blot鉴定
    4 EgG1Y162-2蛋白的三级结构
讨 论


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3049046