C1QBP在单核/巨噬细胞趋化运动中的作用

发布时间：2021-03-10 01:49

　　目的：单核/巨噬细胞的趋化运动是机体免疫应答、炎症反应、肿瘤转移的重要环节。我们之前的研究已表明PKCζ是调节单核/巨噬细胞趋化运动的关键分子。在对PKCζ进行蛋白组学研究时,采用质谱分析的方法筛选并鉴定了一个PKCζ的新结合分子-C1QBP。我们前期研究发现应用小RNA干扰技术C1QBP沉默可以抑制CSF-1诱导的单核/巨噬细胞的趋化运动。由此提出：C1QBP可能通过调控PKCζ的活性来调节单核/巨噬细胞的趋化运动。本研究拟建立C1QBP低表达细胞株,探讨其对单核/巨噬细胞迁移、黏附能力的影响,初步明确C1QBP在单核/巨噬细胞趋化运动中的作用机制。本研究初步阐明了C1QBP通过PKCζ调控单核/巨噬细胞趋化运动的作用机理,对深入探讨炎症性疾病的发病机制和探索防治肿瘤的新措施具有重要意义。方法：1.用免疫共沉淀的方法检测PKCζ与C1QBP的相互作用。2.用免疫荧光的方法检测C1QBP与PKCζ在细胞中的定位情况。3.应用StealthTM NA降低单核/巨噬细胞中C1QBP蛋白的表达水平,用Western Blotting验证其表达。4.应用慢病毒载体介导的RNA干扰技术构建C1Q... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
1 对象和方法
    1.1 细胞系
    1.2 质粒
    1.3 常规试剂和耗材
    1.4 各实验所需主要试剂及溶液的配制
    1.5 主要仪器设备
    1.6 实验方法
    1.7 统计学分析
2 结果
    2.1 C1QBP及PKCζ在细胞中的表达
    2.2 C1QBP降表达对THP-1细胞趋化运动的影响
    2.3 C1QBP降表达对THP-1细胞聚合能力的影响
    2.4 共聚焦显微镜观察C1QBP及PKCζ在THP-1细胞中的表达及定位
    2.5 C1QBP与PKCζ在THP-1细胞中的相互作用
    2.6 利用慢病毒载体建立C1QBP稳定降表达的细胞系RAW264.7
    2.7 C1QBP降表达减弱RAW264.7细胞迁移能力
    2.8 C1QBP与PKCζ在RAW264.7细胞中存在相互作用
    2.9 共聚焦显微镜观察C1QBP及PKCζ在RAW细胞中的表达及定位
    2.10 C1QBP表达降低减弱RAW264.7细胞趋化运动
    2.11 C1QBP表达降低减弱RAW264.7细胞黏附能力
    2.12 C1QBP表达降低对相关信号蛋白磷酸化水平的影响
3 讨论
4 小结
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述
    综述参考文献
致谢



本文编号：3073846