一种高效促进血小板生成的全新型融合蛋白SCF-TPO的分子设计及其生物学活性研究

发布时间：2021-03-19 21:33

　　血小板减少症不仅是恶性血液病（如白血病、淋巴瘤及多发性骨髓瘤等）诱导缓解、巩固和加强化疗阶段的主要并发症,也是实体瘤及其它影响造血细胞疾病患者放化疗过程常见的严重并发症。血小板减少症的出现不仅增加了患者出血、感染引起的相关死亡风险,也由此限制了使用细胞毒性化疗药物的最大杀伤剂量。对肺癌、乳腺癌及卵巢癌等实体瘤有特效的新化疗药gemcitabine治疗过程中出现的血小板减少症限制了该药物的临床有效应用。同时,血小板减少症也是骨髓增生异常综合征（MDS）、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、爱滋病（AIDS）及慢性肝病等疾病治疗过程中常见并发症,这类疾病出现的慢性血小板减少症起因为血小板生成缺陷或减少、免疫或非免疫性血小板破坏增强,另外进行肝移植、心血管手术等患者也常伴发血小板减少症,最终引起患者死亡率增加。有关血小板减少症的治疗始终是世界性医学难题。 目前临床上治疗严重血小板减少症的唯一方法是血小板输注。尽管输注血小板可以暂时缓解化放疗所致血小板减少引起的严重出血等并发症,但多次反复输注血小板增加了疾病传播机会、发热、同源免疫反应及移植 

【文章来源】：中国人民解放军军事科学院北京市

【文章页数】：88 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

PET32a/SCF一TPO表达产物的SDS一APGE电泳结果

6表达条件的优化为了提高菌种的表达量，我们也尝试了不同大肠杆菌菌株如BL21(DE3)plyss、JM101、JM109作为宿主菌，并对影响该融合蛋白表达的几种因素进行了优化。发现各种菌株的表达量有一定的差异，而BL21(DE3)plyss有较高的表达，如图1.7所示。同时我们还对诱导时I司对表达量的影响进行了研究，结果发现在诱导4一5小时后表达量可达最高值。如图1.8所示。

AW七stenrblotwithantibodygaainstSCFBW匕stenrblotwithantibodyagainstTPO图1.9.pET32留SCF一TPo表达产物的免疫印记结果Figl.gW匕stenr一blotanalysisoftheProduetsexPressedbyPET32ajSCF一TPOColorMarker:176.5，113.7，80.9，63.8，37.4，26.0，19.6，14.9，8.4l一2:ExPressedProtein3:Negativeeontrol三、讨论近十几年来，随着对各种造血生长因子蛋白基因结构和功能研不断深入，采用细胞因子融合技术构建一新型细胞因子融合蛋白，


本文编号：3090264