可示踪的防龋基因疫苗构建、表达及其基因疫苗PELA微球的研究

发布时间：2024-06-30 08:59

　　本研究将微生物学、免疫学、分子生物学和生物材料学等多学科有机结合起来，运用基因重组技术构建了可示踪的防龋基因疫苗；对可生物降解材料作为防龋基因疫苗释放系统进行了研究；并对防龋基因疫苗在体内外的表达以及不同方式免疫的BALB／C小鼠的特异性抗体进行了检测。通过GFP的指示作用及免疫组化方法，对防龋基因疫苗在体内外的表达进行初步的示踪研究，为防龋基因疫苗的临床应用奠定基础。本研究共包括四个部分。 第一，本研究构建了以绿荧光蛋白基因作为报告基因的可示踪的防龋基因疫苗。利用PCR方法，扩增变异链球菌(Streptococci mutans，S．mutans)MT8148菌株表面蛋白抗原PAC氨基端的基因片段pac-A(1.3Kb)。PCR产物与真核表达质粒pEGFP-C1双酶切，并回收相应DNA片段后，采用DNA连接试剂盒进行连接重组，转化。转化子中的重组质粒经双酶切鉴定，获得了4.7Kb与1.3Kb两个片段；重组质粒中插入基因的序列测定表明，该插入序列与pac全基因的314-1630bp的核酸序列完全相同，插入基因的两侧分别与Kpn Ⅰ和Apa Ⅰ酶切位点的序列一致，插入基因的上游有...

【文章页数】：127 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分 可示踪的防龋基因疫苗的构建
    材料和方法
    结果
    讨论
    小结
    附图
第二部分 重组质粒在体外哺乳动物细胞中的表达
    材料和方法
    结果
    讨论
    小结
    附图
第三部分 防龋基因疫苗DNA／PELA微球的制备、性质及其体外转染的研究
    材料和方法
    结果
    讨论
    小结
    附图
第四部分 防龋基因疫苗及其PELA微球免疫BALB／c小鼠的实验研究
    材料和方法
    结果
    讨论
    小结
    附图
主要参考文献
文献综述 基因转移中非病毒运载体系统的研究进展
    参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3998625