中脑星形胶质细胞来源的神经营养因子对糖氧剥夺/再灌注诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

发布时间：2021-03-29 12:42

　　目的研究中脑星形胶质细胞来源的神经营养因子（mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor,MANF）对糖氧剥夺/再灌注（oxygen-glucose deprivation/reperfusion,OGD/R）诱导的人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）损伤的保护作用。方法体外培养SH-SY5Y细胞,对细胞进行糖氧剥夺（OGD）6 h,再灌注（R）12 h。在再灌注时期,根据是否给予重组人MANF蛋白处理（2μmol·L-1,12 h）,将细胞分为正常对照组（NC）、NC+MANF组、OGD/R组和OGD/R+MANF组。随后光学显微镜下观察SH-SY5Y细胞形态的改变,MTT法检测细胞存活率,PI染色法检测细胞死亡率,免疫印迹法检测内源性MANF蛋白、内质网（ER）应激相关蛋白GRP78/Bi P、p-IRE1、p-e IF2α及促凋亡蛋白cleaved caspase-3和CHOP的表达。结果光学显微镜下可见OGD/R组SH-SY5Y细胞胞体变小、变圆,突起缩短或消失。进一步研究发现,MANF能明显改善OGD/R诱导的SHSY... 

【文章来源】：中国药理学通报. 2015,31(06)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞及主要试剂
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 缺血/再灌注损伤模型的建立
        1.2.3 MTT法检测细胞存活率
        1.2.4 PI染色检测细胞死亡率
        1.2.5 免疫印迹法检测经OGD/R处理后MANF蛋白、ER应激及凋亡相关蛋白的表达
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 重组人MANF改善OGD/R诱导损伤的SH-SY5Y细胞增殖活性
    2.2 重组人MANF抑制OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞死亡
    2.3 OGD/R诱导的ER应激相关蛋白表达及MANF的作用
    2.4 OGD/R诱导的促凋亡蛋白表达及MANF的作用
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]MANF对神经细胞中tau蛋白过度磷酸化的抑制作用[J]. 李静,王涛,沈玉君,方圣云,沈玉先.  中国药理学通报. 2012(08)



本文编号：3107568