含CCT基序的寡核苷酸对TLR7/9介导的天然免疫应答的抑制作用

发布时间：2021-04-16 09:10

　　抑制性寡核苷酸（inhibitory ODN）是一种人工合成的Toll样受体拮抗剂,具有特定核苷酸顺序的单链DNA分子,多为硫代修饰的骨架结构,长度通常在15-30核苷酸,能抑制由内源性或外源性TLR配体引起的免疫细胞的激活,在治疗与Toll受体活化的相关疾病方面展示了广阔的应用前景。我们应用HSV-1和PR8-flu病毒建立了抑制性ODN的筛选平台,对自行设计的ODN的进行了筛选,将其中抑制活性最强的含CCT基序的ODN命名为IMO03,并对其功能特点和作用机理进行了初步的研究。实验结果表明,IMO03不仅能抑制由天然的和人工合成的TLR7/9的配体诱导的人外周血单个核细胞（PBMC）的免疫活化,也能抑制系统性红斑狼疮患者血清及其来源的DNA片段引起的人PBMC免疫激活作用,这种作用可能依赖于竞争性结合TLR受体。IMO03不仅可以抑制人类免疫细胞的激活,还能保护小鼠避免死于CpG诱导的脓毒血症的休克。我们的研究证明了不含“G”碱基的抑制性ODN（IMO03）对脓毒血症模型小鼠具有治疗作用,而且该抑制作用有TLR选择性——只是针对TLR7/9受体的活化,并不针对TLR3/4的活化。I... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：140 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

Toll样受体在细胞内的传导通路及在细胞表达Fig1.1TLRsignalingandexpressionofTLRsinimmunecells(T.Kawaietal.,2007)

TLR-MyD88信号传导途径在脓毒血症发病机理中扮演着重要的角色（WeighardtH et al., 2002）。图1.2 脓毒血证的发病机理Fig 1.2 Sepsis pathogenesis (Buras JA et al., 2005)2.1.5.2 系统性红斑狼疮（Systemic Lupus Erythematosus, SLE）SLE 是一种较常见的累及多系统多器官的自身免疫性疾病，由于细胞和体液免疫功能障碍，产生多种自身抗体。关于 SLE 的发病和 TLR 的关系，是近年来自身免疫性疾病中研究的最多的，关系也逐渐明确。SLE 患者血浆内存在着高水平的 IFN-α，pDC 作为人体 IFN-α的主要来源（Liu YJ. 2005）与 TLR 引起与自身免疫性疾病的关系十分密切。TLR 活化原因有两种，一种是外源的细菌或病毒感染，另一种就是自身免疫复合物的存在。尽管 SLE 的病因还不明确，但细菌和病毒感染一直被怀疑是诱发 SLE 的关键因素（Zandman-Goddard G et al., 2003）（图 1.3）。人体天然免疫系统主要通过 Toll 样受体识别细菌和病毒。病毒是 pDC 激活分泌 IFN-α的始动因素

14图 1.3 Toll 样受体，IFN-α和 SLEFig 1.3 TLRs, IFN-α and SLE (Marshak-Rothstein A 2006)2.1.5.3 类风湿性关节炎（Rheumatoid Arthritis, RA）类风湿性关节炎是一种以关节滑膜炎为特征的自身免疫性疾病。滑膜炎持久反复发作，可导致关节内软骨和骨的破坏，关节功能障碍，甚至残废。在动物模型上，小鼠来源的RF阳性自身反应性B细胞能通过B细胞表面抗原受体（BCR）和TLR7/9受体依赖途径被IgG2a、DNA、RNA、或DNA/RNA免疫复合物所激活（Lau CM et al., 2005; Marshak-Rothstein A. et al., 2003; Viglianti G A et al., 2003Leadbetter E A et al., 2002）。最近的研究表明HMGB1（high-mobility group box 1）蛋白与CpG DNA复合物可以通过TLR9信号通路，活化B细胞和pDC，分泌RF抗体和相关的炎性因子（Tian J et al., 2007）。


本文编号：3141148