人calpain1大亚基相作用的蛋白质筛选及其在Angll诱导心肌细胞肥大模型中功能的初步探索

发布时间：2021-05-13 10:06

　　目的：Calpain是一种钙离子激活的中性蛋白水解酶。自1964年从大鼠脑内提取出来后，其生物学功能并不十分清楚。研究发现，它与肌纤维和神经纤维的降解有关，也可以水解并激活PKC和磷酸化酶b等蛋白质。最新的研究表明calpain参与了细胞凋亡的过程。但有关calpain相关的信号传导通路尚不清晰。本实验应用酵母双杂交系统探讨心脏中与calpain相作用的蛋白质，从而了解calpain相关的信号传导通路及其在心肌肥厚中的变化。 方法：我们用PCR的方法从含有calpain1大亚基全长cDNA序列的质粒中分别扩增全长基因和它的结构域Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ各个片段的基因并与DNA结合结构域（DNA binding domain，DBD）表达载体重组得到4种诱饵蛋白的表达载体即pGBKT7-CANP、pGBKT7-CANPⅡ、pGBKT7-CANPⅢ、pGBKT7-CANPⅣ。乙酸锂转染法分别将上述4种含DBD诱饵质粒转入AH109酵母菌中得到AH109／pGBKT7-CANP、AH109／pGBKT7-CANPⅡ、AH109／pGBKT7-CANPⅢ、AH109／pGBKT7-CANPⅣ。再将含人... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：127 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
目录
缩略语
第一部分 应用YTH筛选人心脏cDNA文库中能与calpain 1大亚基结合的蛋白质分子
    摘要
    前言
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    小结
    参考文献
第二部分 MTH以及Co-IP验证calpain 1大亚基与AES、FHL-2、SH3BGR的结合作用
    摘要
    前言
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    结论
    参考文献
第三部分 calpain、FHL-2、AES在Angll诱导体外心肌细胞肥大模型中功能的初步探索
    摘要
    前言
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    小结
    参考文献
综述
致谢
发表论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]Calpain10基因多态性与中国人2型糖尿病遗传易感性的相关性研究[J]. 纪立农,陈陵霞,韩学尧,祝方.  中国糖尿病杂志. 2002(01)
[2]Calpain-10基因的SNP组合变异与2型糖尿病及其临床代谢性状的关系[J]. 项坤三,方启晨,郑泰山,贾伟平,王延庆,张蓉,李杰,沈坤雪.  中华医学遗传学杂志. 2001(06)
[3]Calpain-10基因多态性与糖耐量异常状态、胰岛素分泌及胰岛素敏感性的相关性[J]. 项坤三,郑泰山,贾伟平,王延庆,沈坤雪,李杰.  中华内分泌代谢杂志. 2001(05)
[4]Calpain抑制剂-1对大鼠急性缺血再灌注诱导心肌细胞凋亡的影响[J]. 徐冬梅,刘正湘.  中国组织化学与细胞化学杂志. 2001(02)
[5]Calpain在卡铂引起的耳蜗Ⅰ型传入神经系统损害中的作用[J]. 丁大连,王家东,Richard J.Salvi.  中国耳鼻咽喉颅底外科杂志. 2001(01)
[6]钙蛋白酶及钙蛋白酶抑制蛋白mRNA在类风湿关节炎发病机制中的作用[J]. 徐建华,张仁利,孙桂华,杨明功,帅宗文,张锐.  中华风湿病学杂志. 2000(06)
[7]Calpain在噪声损害毛细胞中的角色[J]. 丁大连,李明,王坚,Salvi．RJ.  中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志. 2000(04)
[8]钙离子与钙依赖蛋白酶在心肌顿抑中的作用[J]. 朱珊珊.  国外医学.麻醉学与复苏分册. 2000(04)
[9]中枢神经系统钙稳态失调在阿尔采末病发病机制中的作用[J]. 冯征,张均田.  中国药理学通报. 2000(03)
[10]卡配因及其抑制剂在脑缺血中的作用[J]. 肖小华,黄如训.  国外医学(脑血管疾病分册). 1999(04)



本文编号：3183822