结核分枝杆菌新型抗原Rv3117联合DDA/MPL佐剂作为亚单位疫苗在小鼠体内的免疫评估

发布时间：2021-05-16 13:15

　　目的用结核分枝杆菌（M.tuberculosis）特异性抗原Rv3117联合双十八烷基二甲基溴化铵（DDA）/单磷酰脂质体A（MPL）佐剂构建结核亚单位疫苗（Rv3117/DDA/MPL）,并在C57BL/6小鼠体内评估其加强卡介苗（BCG）首次免疫后的免疫效应。方法采用分子克隆方法构建重组质粒p ET32a-Rv3117,转入感受态大肠埃希菌BL21（DE3）PLys S,诱导表达并纯化目的蛋白,用Triton X-114相分离法去除目的蛋白中的内毒素,然后与DDA/MPL佐剂充分乳化构建亚单位疫苗。C57BL/6小鼠随机分为对照组（未予任何处理）、PBS组（免疫PBS）、BCG组（单纯首次免疫BCG）、BCG+DDA/MPL组（首次免疫BCG,2周后用佐剂DDA/MPL加强免疫2次）和BCG+Rv3117/DDA/MPL组（首次免疫BCG后用亚单位疫苗Rv3117加强免疫2次）,每组5只。分别采用酶联免疫斑点检测（ELISPOT）和酶联免疫吸附测定（ELISA）技术对免疫小鼠的细胞免疫和体液免疫进行评估。结果成功克隆表达并纯化结核特异性抗原Rv3117。ELISPOT和ELISA结... 

【文章来源】：上海交通大学学报(医学版). 2015,35(01)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1. 1 实验材料
    1. 2 方法
    1. 3 统计学方法
2 结 果
    2. 1 重组蛋白的纯化
    2. 2 内毒素检测结果
    2. 3 ELISPOT 检测结果
    2. 4ELISA 检测结果
3 讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]结核分枝杆菌特异性抗原Rv3117的克隆表达和诱导小鼠免疫应答的实验研究[J]. 汤俊明,陈翠翠,王学才,赵俊伟,张舒林.  上海交通大学学报(医学版). 2012(11)



本文编号：3189756