人滑膜间充质干细胞向软骨诱导分化的基础研究

发布时间：2021-05-22 00:48

　　目的探讨人滑膜间充质干细胞（SMSCs）向软骨诱导分化的条件及分子机制,为半月板组织工程修复提供基础。方法选取膝关节创伤患者5例,关节镜下取滑膜组织4～8片,每片约1 mm×3 mm×1 mm,加入含10%胎牛血清的低糖培养基进行原代及传代培养,以单克隆培养法获得纯化的滑膜间充质干细胞系,后采用流式细胞仪进行干细胞表型鉴定,并向完全培养基加转化生长因子-β1（TGF-β1）、地塞米松（DEX）、维生素C（VC）进行软骨诱导分化,采用免疫组化法检测诱导后Ⅱ型胶原（COLⅡ）的表达情况。结果含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基最有利于细胞生长,采用单克隆培养法可获得纯化较高的细胞;流式鉴定细胞表型:细胞表达CD44、CD90,不表达CD34、CD45;免疫组化法检测未经诱导的细胞形态基本保持梭形,而诱导14 d后逐渐由小梭形变为多角形,可见大量棕色颗粒,COLⅡ阳性表达。结论人SMSCs优化生长条件:含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基最有利于细胞生长,采用单克隆培养法可获得纯化较高细胞,且分离纯化的细胞免疫原性较低,适用于同种异基因体之间移植,可作为半月板组织工程修复的种子细胞。 

【文章来源】：中国医师杂志. 2019,21(09)

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要仪器设备及试剂
    1.2 实验方法
        1.2.1 人SMSCs的取材、分离、培养、传代
        1.2.2 分子表型鉴定及增殖动力分析
        1.2.3 体外条件下TGF-β1诱导SMSCS向软骨细胞谱系分化
        1.2.4 免疫组化染色检测诱导后软骨细胞标志性产物
2 结果
    2.1 原代滑膜细胞的生长特征
    2.2 单克隆培养法结果
    2.3 SMSCs增殖能力
    2.4 滑膜间充质干细胞表型鉴定
    2.5 SMSCs向软骨细胞诱导分化检测
3 讨论



本文编号：3200666