支原体小GTP结合蛋白类似片段（SGLP）与宿主细胞Rac1和Stat3相互作用及其功能影响

发布时间：2021-05-26 14:33

　　目的探讨细胞培养中支原体污染的种类及清除方法。方法检测实验室不同培养者培养的各细胞系污染支原体情况。首先设计支原体种属特异性的简并引物，针对其16s-23s基因间隔区序列，用来检测支原体阳性片段条带。根据简并引物扩增的片段测序明确为何种支原体污染。然后针对污染支原体的种类和滴度，采用方差分析方法，经过统计检验，探索一种合理的配方药物用于细胞培养，能够短期杀灭细胞培养中污染的支原体。对于药物对支原体的杀灭作用采用定量PCR的方法检测，对于药物对细胞的副作用，采用流式细胞数测细胞周期的方法作为指标来评估。对于细胞内支原体的污染，采用免疫荧光后激光共聚焦显微镜观察的方法来明确细胞内变化。结果1)设计的支原体属及莱氏无胆甾原体属简并引物及特异性引物可以快速的检测出有无支原体污染，根据条带对比可以初步明确为何种支原体污染，进一步明确还可以通过测序的金标准来明确。通过该方法可以快速的检测且准确性可靠。2)经方差分析各种药物浓度组合，筛选出具有抗支原体作用显著的几种组合。药物选自三种类型，分别为：截短侧耳素类，第三代喹诺酮类及以上，四环素类。分别配成A,B,C液。所述试剂由A液、B液等体积混合或A液... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：94 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
引言
    参考文献
第一部分：细胞培养中支原体污染的鉴定和清除
    摘要
    Abstract
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
第二部分：支原体小GTP结合蛋白类似片段（SGLP）与宿主细胞Rac1和Stat3相互作用及其功能影响
    摘要
    Abstract
    材料和方法
    结果
    讨论
    参考文献
文献综述
    参考文献
附:试剂配方
发表论文和专利
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]活性氧与骨髓造血干细胞衰老研究进展[J]. 柴笑,赵明峰.  中国实验血液学杂志. 2012(06)
[2]Mycoplasma infections and different human carcinomas[J]. Su Huang; Ji You Li; Jan Wu; Lin Meng; Cheng Chao Shou Beijing Institute for Cancer Research, Peking University School of Oncology, Beijing 100034. ChinaSu Huang, received B. A from Jiangxi Medical College of China in 1994. Now she is a graduate student pursuing a Ph. D degree at the Peking University School of Oncology..  World Journal of Gastroenterology. 2001(02)



本文编号：3206538