载脂蛋白E对小鼠卵泡发育影响机制的研究

发布时间：2017-04-22 19:06

  本文关键词：载脂蛋白E对小鼠卵泡发育影响机制的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：肥胖伴随着生活水平的提高逐渐流行起来，与此同时肥胖导致的疾病也迅速增长。肥胖可导致多种病症，全身各器官都可能受影响，对女性有更大的危害。在生殖系统方面，肥胖可导致女性排卵障碍使不孕率升高，多囊卵巢综合征（PCOS），早期子痫，妊娠高血压，月经失调，，妇科癌症。 载脂蛋白E（Apolipoprotein E，ApoE）是载脂蛋白家族的一个成员。APOE主要在肝脏和脑中合成，巨噬细胞也可合成一部分。APOE作用包括参与神经系统的修复、免疫调节、脂质的代谢。参与脂质代谢是APOE的主要功能，它作为极低密度脂蛋白（VLDL）和乳糜微粒（CM）的组成成分，能够清除血液中VLDL和CM的残粒，调节血清脂质浓度；作为低密度脂蛋白（LDL）受体的配体介导LDL的组织吸收；作为高密度脂蛋白（HDL）的成分参与胆固醇的逆转。鉴于APOE在脂质代谢过程中的重要作用，ApoE基因敲除模型被广泛应用，该模型在正常饮食下即出现脂质代谢紊乱和高脂血症，因此它是研究高脂血症发病机理以及干预措施的理想模型。国内外研究大都集中在动脉粥样硬化及其药物的筛选上。 类固醇激素是一类以胆固醇为底物合成的性激素，具有极为重要的生理作用，主要包括雌激素、雄激素、孕酮，它们对生殖的调控发挥极大作用。由于类固醇激素与胆固醇和生殖的密切联系，本实验室首次利用了ApoE-/-模型研究ApoE对小鼠生殖能力的影响。结果表明ApoE-/-小鼠出现严重高血脂症，脂质代谢紊乱，脂质在卵巢中积累，造成卵巢超重，在ApoE-/-小鼠性成熟后的发情周期出现紊乱，发情期的天数显著低于野生型。ApoE-/-小鼠在出生时卵泡较多，但是凋亡很快，在出生后100天（D100）卵泡数目相对于野生型显著下降，表明ApoE的缺失对小鼠卵泡发育产生一定的影响。本实验以先前的研究为基础，继续探究了ApoE缺失对卵泡发育影响的机制。本实验选取了出生后4天（D4）和100天（D100）的小鼠的卵巢，首先对磷脂酰肌醇-3（PI3K）信号通路相关基因丝氨酸苏氨酸蛋白激酶1（Akt1）、BCL-2相关的细胞死亡激活剂（Bad）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、核转录因子κb （Nfkb）、磷酸酶与张力同源蛋白（Pten）、结节硬化蛋白复合物2（Tsc2）以及类固醇激素合成相关基因细胞色素p450芳香化酶（Cyp19a1）、3β-羟化类固醇脱氢酶（Hsd3b）的表达量进行了研究。Real-time PCR结果证明在D100中的ApoE-/-小鼠中的Cyp19a1、Hsd3b、 mTOR、Nfkb，相对于野生型小鼠显著下降， Bad、Tsc2显著上升。而在D4，ApoE-/-小鼠中的Hsd3b和mTOR的表达是显著上调的。之后我们又选取了野生型和ApoE-/-小鼠出生后56天（D56）和出生后100天（D100）的小鼠对血清中的雌激素和孕酮水平进行检测。所有小鼠均处于发情前期。结果表明在D100时ApoE-/-小鼠血清中的雌激素和孕酮水平显著低于野生型，而在D56时没有明显变化。由此我们得出结论ApoE的缺失可能干扰了PI3K信号通路以及类固醇激素合成相关基因的表达进而影响卵泡的发育。
【关键词】：载脂蛋白E 生殖 PI3K 卵巢 卵泡 激素
【学位授予单位】：山东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R589.2;R321
【目录】：

• 目录4-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 缩写词10-11
• 综述11-24
• 1. 生殖11-14
• 1.1 雌性生殖系统11
• 1.2 类固醇激素11-12
• 1.3 卵泡发育12-14
• 2. 生殖与肥胖14-17
• 2.1 肥胖及其危害14-16
• 2.2 肥胖与生殖的关系16-17
• 3. 磷脂酰肌醇3信号通路17-18
• 4. 载脂蛋白E18-24
• 4.1 载脂蛋白 E 的生物学性质18-19
• 4.2 载脂蛋白 E 的多态性19
• 4.3 载脂蛋白 E 的功能19-22
• 4.4 载脂蛋白 E 敲除小鼠22
• 4.5 载脂蛋白 E 对小鼠卵泡发育的影响22-24
• 第一章 小鼠基因型鉴定24-28
• 1 材料与方法24-26
• 2 实验结果26-27
• 3 讨论27-28
• 第二章 类固醇激素合成基因及 PI3K 信号通路相关基因的表达28-34
• 1 材料与方法28-32
• 2 实验结果32
• 3 讨论32-34
• 第三章 小鼠激素检测34-38
• 1 材料与方法34-36
• 2 实验结果36-37
• 3 讨论37-38
• 小结38-39
• 参考文献39-43
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文43-44
• 致谢44

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 诸定寿,史小林,路欣,翁静,许睛,梁元晶;妊娠小鼠子宫腺细胞区的碱性磷酸酶与酸性磷酸酶的研究[J];中国组织化学与细胞化学杂志;1996年02期

中国博士学位论文全文数据库 前5条

1 张宝乐;猪Gpr3基因特征、表达及其对卵泡颗粒细胞的影响[D];南京农业大学;2012年

2 李伟;苦马豆素诱导山羊黄体细胞凋亡的信号转导通路研究[D];西北农林科技大学;2013年

3 翟博;BMP15调节猪卵丘细胞凋亡的信号通路研究[D];吉林大学;2013年

4 王勇;NGF及其受体对卵泡发育调控的分子机制研究[D];中国科学技术大学;2013年

5 孙婧;牛初级卵泡体外培养体系的建立和miR-27a在小鼠颗粒细胞中的功能的研究[D];中国农业大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前6条

1 张婷;载脂蛋白E对小鼠生殖能力影响的研究[D];山东师范大学;2013年

2 彭婧;Kisspeptin/GPR54对大鼠卵巢黄体细胞内分泌功能的影响及其机理[D];南昌大学;2012年

3 张姝;AL-8810对水牛卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育作用的研究[D];华中农业大学;2013年

4 李云芳;GDF-9转基因小鼠模型的建立[D];广西大学;2013年

5 白龙;奶山羊卵巢特异性启动子的克隆及其转录活性的研究[D];西北农林科技大学;2013年

6 王硕;比较移植及体外培养对小鼠卵巢卵泡早期发育的影响[D];华中科技大学;2013年

  本文关键词：载脂蛋白E对小鼠卵泡发育影响机制的研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：321058