衰老及IDO-1/COX-2基因修饰对脐带间充质干细胞免疫调节功能的影响

发布时间：2021-06-07 18:02

　　目的：研究脐带间充质干细胞（UC-MSCs）的衰老对其免疫调控能力的影响。并利用转基囚技术使脐带间充质干细胞（UC-MSCs）过表达吲哚胺2,3双加氧酶-1（IDO-1）或环加氧酶-2（COX-2）,研究其对MSCs免疫抑制功能的影响。方法：1.运用组织块贴壁法从脐带中获得间充质干细胞（MSCs）,并在常氧条件下进行传代培养,通过细胞染色观察传代过程中MSCs形态及核质比的变化。2.分别选取第5代（对照组）及第13代（衰老组）MSCs进行研究,运用细胞衰老特异性β-半乳糖苷酶检测试剂盒进行衰老检测。对照组及衰老组MSCs分别与外周血单个核细胞（PBMC）共培养,同时采用CCK-8细胞计数试剂盒检测MSCs（?）寸淋巴细胞增殖能力的影响。3.通过实时定量PCR方法检测免疫调控相关基因在对照组与衰老组MSCs中的表达情况。4.分别构建含靶基因IDO-1、COX-2的真核表达重组质粒pEGFP-N3/IDO-1及pEGFP-N3/COX-2,运用电转染方法将其转染入MSCs中,并通过Western Blot方法验证重组质粒中靶基因的表达情况。5.转染后MSCs分别记为IDO-1+组、COX-... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
目录
CONTENTS
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 间充质干细胞的衰老对其免疫调控能力的影响
    材料和方法
    结果
    讨论
第二部分 过表达IDO-1和COX-2对间充质干细胞免疫调控能力的影响
    材料和方法
    结果
    讨论
结论
附图表
参考文献
致谢
在学期间发表文章
学位论文评阅及答辩情况表


【参考文献】：
期刊论文
[1]人骨髓和脐带来源间充质干细胞体外支持造血能力的比较研究[J]. 刘蒙,杨少光,刘鹏霞,杜伟廷,顾东生,卢士红,邢文,韩忠朝.  中国实验血液学杂志. 2009(05)



本文编号：3217042