人Fcα/μR的表达与功能的初步研究

发布时间：2021-06-11 05:37

　　人Fcα/μR是IgA和IgM的Fc受体,能与多聚体IgM/IgA结合,因此可能在系统免疫和粘膜免疫中都有重要的作用。其基因位于1号染色体1q32,毗邻其它FcR基因,包括Poly Immunoglobulin Receptor（pIgR）。经蛋白序列分析,Fcα/μR是Ⅰ型跨膜蛋白,其膜外区有三个结构域组成,一个短的EC1区、一个免疫球蛋白样结构域的EC2区和一个特殊的EC3区。EC2区与pIgR胞外第一个结构域（D1）同源性很高,预测是结合IgM/IgA的区域。据报道,人Fcα/μR表达在扁桃体生发中心的滤泡树突状细胞、肾远曲小管和小肠潘氏细胞。为了研究Fcα/μR的性质,需要得到正确折叠的受体,而原核细胞表达的Fcα/μR以包涵体形式存在,难以以复性方式得到正确折叠的可溶性受体。为此我们尝试了用酵母和哺乳细胞真核表达Fcα/μR。在毕赤酵母中分泌表达的人Fcα/μR的膜外区在C端带MycHis₆标签,可以用Ni柱亲和纯化。经Western Blot鉴定,得到多个特异性条带（32-47、50、80、140kDa）,我们推测32-47kDa条带是部分降解的目的蛋... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：129 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

人Fc侧林R基因在染色体上的定位及邻近的Fc受体

图1.人Fc侧林R基因在染色体上的定位及邻近的Fc受体Fea单R全长eDNA序列(如图2)由69bps’一UTR(untranslatedregion)、1阅读框和3’一UTR(含polyA)组成。人Fc留林R编码基因全长含有6个外显子(ECZ、Ee3、TM和CY)和6个内含子。外显子sP很短，只有61bp，编码起To和giJ’导肤的大部分序列;外显子ECI(144bp)、ECZ(339bp)和EC3(编码一个胞外结构域，其中ECZ为免疫球蛋白样结构域;外显子TM(11g是疏水氨基酸的跨膜区;外显子CY(374bP)编码一个很短的胞质尾部。Fca它选择性剪切形式，位于EC3与TM外显子间的内含子5的第一个密码子即码TAA，当此内含子没有被切掉，跨膜区和胞内区则会丢失，从而形成一个的Fca单R。Fca单R基因在肾小球系膜细胞中存在着膜型和可溶型两种不同位，且这两种转录形式均可被IL一1上调22。

肤链由5犯个氨基酸残基组成，其中N端10个氨基酸残基组熟时在前导肤末位的丙氨酸残基和成熟肤链第一位的亮氨成熟的含有522个氨基酸残基的I型跨膜糖蛋白。Fca单R胞结构域(EC2)和两个其它结构域组成，有2个可能发生N一胧氨酸(Csl，C82，C98，C107，C150和C153)。其中除于免疫球蛋白样结构域，维持p折叠三明治结构的二硫键相连的是20个疏水氨基酸残基组成的跨膜区(其中不含有)和61个氨基酸残基组成的胞内区。人Fca单R的胞内区不，也不含有酪氨酸位点，但是含有丝氨酸和苏氨酸位点。的胞外区有4个可能发生N一糖基化修饰的位点，胞内区有一其它结构与人Fca单R相似(如图3)。


本文编号：3223928