人外周血淋巴细胞增殖试验的优化及其应用

发布时间：2021-06-20 13:22

　　目的:优化人外周血淋巴细胞增殖试验条件;考察动物源材料的Gal抗原含量与淋巴细胞增殖效应的相关性;并比较人外周血淋巴细胞与小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验对动物源材料的敏感性差异。方法:从细胞接种量,阳性对照（刀豆球蛋白A,Con A）的工作浓度与细胞培养时间,优化人外周血淋巴细胞增殖试验的最佳条件;利用优化的试验方法,通过人外周血淋巴细胞与动物源性材料的（牛跟腱或由牛跟腱纯化的胶原蛋白海绵）匀浆液或浸提液共培养,考察材料的不同前处理方式对人外周血淋巴细胞增殖的影响;参考标准YY/T 1561-2017,检测材料匀浆液或浸提液的Gal抗原含量,分析其抗原含量与淋巴细胞增殖效应的相关性;同时参考标准YY/T 1465.1-2016,考察材料匀浆液与浸提液对小鼠脾脏淋巴细胞增殖效应的影响,并对比分析对动物源材料的敏感性差异。结果:人外周血淋巴细胞增殖试验最佳反应条件经优化确定为:细胞接种量为1×10⁵,阳性对照（Con A）的终浓度选择5～10μg·mL^-1,培养时间为4 d。人外周血淋巴细胞与胶原蛋白海绵（匀浆组与浸提液组）共培养后,样品组与正常细胞对... 

【文章来源】：药物分析杂志. 2019,39(08)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料
    1.1 试验样品
    1.2 试剂与耗材
    1.3 主要设备
2 方法
    2.1 标准曲线的建立
    2.2 试验条件优化
        2.2.1 阳性对照制备
        2.2.2 人外周血淋巴细胞接种和检测
    2.3 考察样品的淋巴细胞增殖效应
        2.3.1 样品制备
        2.3.2 试验样品与细胞共培养及细胞增殖率检测
    2.4 小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验
    2.5 Gal抗原含量检测
    2.6 统计学分析
3 结果
    3.1 标准曲线
    3.2 试验条件优化结果
    3.3 样品淋巴细胞增殖效应的检测结果
    3.4 小鼠脾脏淋巴细胞增殖检测结果
    3.5 Gal抗原含量检测结果
4 小结和讨论


【参考文献】：
期刊论文
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[5]改良MTT比色法测定淋巴细胞增殖反应[J]. 边兴艳,杨明燕,张英.  吉林医学院学报(自然科学版). 1997(02)
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本文编号：3239274