人酸性成纤维细胞生长因子在大肠杆菌和酵母中的表达、纯化及其特性分析

发布时间：2021-07-07 20:04

　　酸性成纤维细胞生长因子（acidic fibroblast growth factor, aFGF）是一种存在于中枢及外周神经系统组织中，对中胚层和神经外胚层来源的多种细胞有营养和促分裂分化作用的重要生长因子。aFGF广泛参与多种生理和病理过程，在促进创伤愈合，营养和促进神经生长，诱导血管形成及再生等方面具有重要的医学价值。研究目的：利用基因工程技术生产活性蛋白不仅可以大幅提高目标蛋白的产量，还能按照人们的需要改变蛋白的特性，生产出具有优良特性和新功能的生物活性药用蛋白。尽管aFGF是一种生物学效应广泛的生长因子，但在实际应用于某种疾病治疗时，人们更希望它具有较好的细胞特异性。目前商品化的haFGF（human acidic fibroblast growth factor）几乎都是利用大肠杆菌表达的重组haFGF，缺乏明显的细胞特异性。先后有人采用定点突变的方法对haFGF的结构进行改造，但在细胞特异性方面没有取得明显的效果。酵母表达系统具有蛋白质的翻译后修饰加工能力，能对表达的外源蛋白进行糖基化修饰，而大肠杆菌表达系统没有这一特点。对haFGF的mRNA序列分析发现haFGF中存在... 

【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：122 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

aFGF的结构

1 绪 论组成。胞外区由三个 Ig 样环状结构域 D1，D2，D3 构成(见图 1.2152-249）、D3（254-360）序列高度保守，D1 保守性较差[17，19]。D2，的连接顺序构成了 FGF 配体的结合位点，D1 在 FGFR 活性中起辅助为保守的疏水性区段。胞内区包括高度变异的近膜区和酪氨酸激酶信号分子的结合部位。不同的 FGFR 表达有一定组织或细胞特异性，的功能。

高亲和性受体上[20]。信号传导号传导机制仍未十分清楚。已有的研究表明质酪氨酸激酶（PTK）类受体。PTK 受体的活性和生长因子受体的自身磷酸化作用是必能域组成。它们被激活的核心步骤就是其催化多个酪氨酸磷酸化。配体诱导的受体二聚作有效地将可转动的 A 环中的酪氨酸残基磷酸其催化域中的另外一些酪氨酸残基，后者则诱导受体二聚作用的机制有多种。FGFs 及其过配体结合诱导受体二聚化，激活跨膜受体列生物应答（图 1.3）。酸性成纤维细胞生长硫酸酯蛋白聚糖形成多价复合物，就能结合化、激活 FGFRs 胞内激酶结构域活化[23]。aFGFheparin

【参考文献】：
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本文编号：3270279