鼠精子抗原Sp17与IL-5融合蛋白的克隆表达及其免疫性避孕效研究

发布时间：2021-08-10 07:33

　　随着基因重组技术的发展和人们对生殖分子生物学的深入认识,免疫性避孕疫苗的研究是将来避孕节育研究的重要方向,免疫性避孕疫苗可能成为控制人口过度增长的理想措施。针对精子/睾丸抗原的免疫性避孕疫苗因可能适用于两性,而一直受到研究者的青睐。目前在利用精子抗原开发避孕疫苗的研究中,虽然对某些特异性精子蛋白抗原及表位多肽进行了免疫避孕效应研究,但尚未取得满意的结果。主要可能有以下两个方面的原因造成:1、精子/睾丸抗原为自身蛋白,抗原性弱;2、生殖道粘膜免疫应答水平低下,未能产生足够有效的特异抗体滴度。因此,增强生殖道特异抗体反应是提高精子抗原避孕效应的一个新的切入点。而生殖道粘膜诱发抗精子蛋白特异抗体的关键则是寻找合适的靶抗原、免疫途径和免疫佐剂。 精子蛋白抗原必须具备睾丸/精子特异性并参与精卵相互作用的特性。其中精子表面蛋白Sp17在人和各种哺乳动物如兔、小鼠及灵长类动物中的精母细胞、精细胞和睾丸/精子中表达,是一种高度保守的哺乳动物蛋白。鼠、兔和人的Sp17有61%的同源性,而人与狒狒有97%的同源性。在受精过程中,sp17通过与卵细胞透明带表面的糖蛋白、乙酰肝素和葡聚糖等结合参与顶体反... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：119 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

sp7lRT一PcR产物的凝胶电泳分析

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图1.5pET/sP17双酶切鉴定Fig1.5Doub]eerstrietionen刃mesdigestionofPET/SP171:ReeombinatedPlasmiddigestedby肠01/}介刀d111:2:Makrer:15kb，gkb，6kb，4.3kb，2.3kb，2.okb，0.skb四、基因序列测定对阳性重组质粒进行测序，显示重组质粒含有完整的小鼠Sp7l基因阅读框，列与目的基因完全吻合(测序报告见Fig1.6)，提示小鼠SP17基因成功克隆T一28(a+)表达载体中且阅读框正确，将其命名为pET/Sp17。

【参考文献】：
期刊论文
[1]从基因水平对IL-5与IL-10在日本血吸虫感染小鼠中作用的探讨[J]. 田小军,薛燕萍,黄敏君,诸欣平.  寄生虫与医学昆虫学报. 2001(04)
[2]TH1/TH2型细胞因子的免疫调节与妊娠[J]. 逯彩虹.  山西医科大学学报. 2001(05)
[3]IL-5在非复制重组痘苗病毒中的表达及其对重组病毒免疫效果的影响[J]. 郭斐,陆柔剑,孙朝晖,马海伦,张颖妹,马大龙,阮力.  病毒学报. 2001(03)
[4]鼻腔应用布地奈德对鼻息肉中IL-5表达的作用[J]. 张罗,韩德民,张勇,周兵.  耳鼻咽喉头颈外科. 2001(01)
[5]实验性哮喘小鼠脾细胞培养上清液IL-5的测定及其意义[J]. 王美琴,钮善福,白春学,方晓惠,陈常庆,陈波.  上海免疫学杂志. 2000(05)
[6]DNA疫苗的分子佐剂研究进展[J]. 晏菊芳,鲍朗.  国外医学(免疫学分册). 2000(04)
[7]哮喘患者诱导痰嗜酸性细胞阳离子蛋白、白细胞介素5水平的改变及其意义[J]. 徐辉,王建东,罗炎杰,程德云.  急诊医学. 2000(03)
[8]以免疫球蛋白为基础的避孕药具研究/设想[J]. 黄宇烽,王一飞,赵金然,吕年青.  中华男科学. 2000(01)
[9]双价痢疾菌苗株免疫小鼠后GALT中ASC的观测[J]. 石辛甫,高杰英,彭红,陈志华,邢丽.  免疫学杂志. 1998(04)



本文编号：3333759