SARS-CoV结构蛋白的抗原性鉴定、DNA免疫与RNA干扰的研究
发布时间:2021-08-31 08:46
2002年末始发于中国广东省的非典型肺炎(infectious atypical pneumonia,),随后也被称为严重急性呼吸综合征(The severe acute respiratory syndrome,SARS),具有高度传染性与致病性。疫情于2003年2月传播至香港,随后迅速向全球各地蔓延。其致病因子于2003年3月被鉴定为一种新的冠状病毒,被命名为SARS冠状病毒(SARS-CoV)。冠状病毒是一类球形、有包膜的病毒,基因组为长约30 kb的单股正链RNA,主要引起人和动物的呼吸道与肠道疾病。SARS-CoV的基因组结构为:5′-帽状结构-复制酶(rep)-刺突糖蛋白(S)-小包膜蛋白(E)-膜糖蛋白(M)-核衣壳蛋白(N)-polyA尾-3′。本研究用大肠杆菌表达出了SARS-CoV的结构蛋白及3CLpro蛋白,检测了SARS恢复期患者血清中的抗体情况,构建了S与N蛋白的DNA疫苗,进行了小鼠免疫试验,并筛选出了数段可特异阻断S、N基因表达的小干扰RNA(siRNA)。该系列研究对于了解SARS-CoV的免疫学特点及为发展SARS-CoV感染的防...
【文章来源】:中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校
【文章页数】:84 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
蛋白表达质粒的鉴定1234567图ZN、E蛋白表达质粒的鉴定
C/MCll0E3CLpRoPPROEXHTapGEX一4T一1pGEX一4T一1ROSettaBL21(DE3)BL21(DE3)30KDa34kDa60kDa2345678910图15蛋白表达质粒的鉴定NAmarkerDL2000;2,PCRProductof5300:3,S300digestedwithEcoRI:4,PCRProduetof0:5,PET-S240di罗stedwithECoRI乙粉Jol:6,PCRduetof5338;7,PGEX一5338digestedwithRI/入勺tl:8,PCRProduetof5324:9,PGEX一5324stedwithECoRI幼白rl;10,DNAmarkerDL150001234567图ZN、E蛋白表达质粒的鉴定l,DL2000:2,PCRProduetofN42PBV220一N422digestedwithBamHI汪七oRPHT-N422digestedwithBamHI伍乞oRPCRProduetofE:6,PGEX一EdigestedEcoRI/入勺rl;7,DL15000
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【参考文献】:
期刊论文
[1]SARS-CoV核衣壳蛋白抗原性鉴定和基因免疫研究[J]. 柯金山,赵平,张景熙,秦照玲,于嘉屏,戚中田. 中华微生物学和免疫学杂志. 2004(08)
[2]SARS患者血清特异性IgG抗体的滴度变化[J]. 李刚,陈雪娟,陈文思,代志琰,崇雨田,杨林,江元森,姚集鲁. 热带医学杂志. 2003(03)
[3]传染性非典型肺炎患者体液免疫特征初步研究[J]. 匡铁吉,董梅,梁艳,雷红,孟祥红,何菊芳,佟爱华,杨彩娥. 军医进修学院学报. 2003(03)
[4]严重急性呼吸综合征康复者志愿特殊献浆前健康检查分析[J]. 崔徐江,王憬惺,聂咏梅,陈会友,袁理,郑鹏,高军瑞,李晓帆,张伟玲,黄可君,任俊. 中国输血杂志. 2003(04)
[5]SARS病人SARS冠状病毒核壳抗原抗体的变化规律[J]. 车小燕,郝卫,丘立文,潘玉先,廖志勇,徐华,陈金军,候金林,Patrick CY Woo,Susanna KP Lau,Kwok Yung Yuen,黄震. 第一军医大学学报. 2003(07)
[6]SARS病毒核衣壳蛋白、膜蛋白在大肠杆菌中的高效表达和纯化[J]. 易艳萍,李楚芳,石玉岭,李林海,李平,黄维,王升启,马清钧,曹诚. 生物工程学报. 2003(04)
[7]非典型肺炎病例标本中新型冠状病毒的分离与鉴定[J]. 祝庆余,秦鄂德,王翠娥,于曼,司炳银,范宝昌,常国辉,彭文明,杨保安,姜涛,李豫川,邓永强,刘洪,甘永华. 中国生物工程杂志. 2003(04)
[8]表达HCV核心蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门菌口服免疫小鼠的研究[J]. 赵平,曹洁,曹明媚,朱诗应,戚中田. 自然科学进展. 2002(09)
本文编号:3374594
【文章来源】:中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校
【文章页数】:84 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
蛋白表达质粒的鉴定1234567图ZN、E蛋白表达质粒的鉴定
C/MCll0E3CLpRoPPROEXHTapGEX一4T一1pGEX一4T一1ROSettaBL21(DE3)BL21(DE3)30KDa34kDa60kDa2345678910图15蛋白表达质粒的鉴定NAmarkerDL2000;2,PCRProductof5300:3,S300digestedwithEcoRI:4,PCRProduetof0:5,PET-S240di罗stedwithECoRI乙粉Jol:6,PCRduetof5338;7,PGEX一5338digestedwithRI/入勺tl:8,PCRProduetof5324:9,PGEX一5324stedwithECoRI幼白rl;10,DNAmarkerDL150001234567图ZN、E蛋白表达质粒的鉴定l,DL2000:2,PCRProduetofN42PBV220一N422digestedwithBamHI汪七oRPHT-N422digestedwithBamHI伍乞oRPCRProduetofE:6,PGEX一EdigestedEcoRI/入勺rl;7,DL15000
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【参考文献】:
期刊论文
[1]SARS-CoV核衣壳蛋白抗原性鉴定和基因免疫研究[J]. 柯金山,赵平,张景熙,秦照玲,于嘉屏,戚中田. 中华微生物学和免疫学杂志. 2004(08)
[2]SARS患者血清特异性IgG抗体的滴度变化[J]. 李刚,陈雪娟,陈文思,代志琰,崇雨田,杨林,江元森,姚集鲁. 热带医学杂志. 2003(03)
[3]传染性非典型肺炎患者体液免疫特征初步研究[J]. 匡铁吉,董梅,梁艳,雷红,孟祥红,何菊芳,佟爱华,杨彩娥. 军医进修学院学报. 2003(03)
[4]严重急性呼吸综合征康复者志愿特殊献浆前健康检查分析[J]. 崔徐江,王憬惺,聂咏梅,陈会友,袁理,郑鹏,高军瑞,李晓帆,张伟玲,黄可君,任俊. 中国输血杂志. 2003(04)
[5]SARS病人SARS冠状病毒核壳抗原抗体的变化规律[J]. 车小燕,郝卫,丘立文,潘玉先,廖志勇,徐华,陈金军,候金林,Patrick CY Woo,Susanna KP Lau,Kwok Yung Yuen,黄震. 第一军医大学学报. 2003(07)
[6]SARS病毒核衣壳蛋白、膜蛋白在大肠杆菌中的高效表达和纯化[J]. 易艳萍,李楚芳,石玉岭,李林海,李平,黄维,王升启,马清钧,曹诚. 生物工程学报. 2003(04)
[7]非典型肺炎病例标本中新型冠状病毒的分离与鉴定[J]. 祝庆余,秦鄂德,王翠娥,于曼,司炳银,范宝昌,常国辉,彭文明,杨保安,姜涛,李豫川,邓永强,刘洪,甘永华. 中国生物工程杂志. 2003(04)
[8]表达HCV核心蛋白的重组减毒鼠伤寒沙门菌口服免疫小鼠的研究[J]. 赵平,曹洁,曹明媚,朱诗应,戚中田. 自然科学进展. 2002(09)
本文编号:3374594
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