Wnt3a联合BMP9诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化

发布时间：2021-09-13 12:02

　　目的探讨Wnt3a单独以及联合骨形态发生蛋白9（BMP9）诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化的作用。方法利用HEK293细胞扩增重组腺病毒AdGFP、AdBMP9、AdWnt3a;分别转染C3H10T1/2细胞3周后,倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态及绿色荧光蛋白表达;流式细胞术检测细胞转染效率;Westernblot法、免疫荧光技术及实时定量PCR（qRT-PCR）分别检测缝隙连接蛋白43（Cx43）、肌钙蛋白T（cTnT）、GATA结合蛋白4（GATA4）、心肌细胞增强因子2C（MEF2C）的表达。结果经HEK293细胞扩增可得到高滴度的重组腺病毒;转染C3H10T1/2细胞3周后,Wnt3a组Cx43、cTnT、GATA4、MEF2C的表达量与空白组比较无明显差异;Wnt3a联合BMP9组的Cx43、cTnT、GATA4、MEF2C基因的表达量显著高于空白组、GFP组和Wnt3a组,与单独BMP9组相比无显著性差异。结论Wnt3a不能单独诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化;Wnt3a联合BMP9可诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化。 

【文章来源】：细胞与分子免疫学杂志. 2015,31(04)北大核心CSCD

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1材料和方法
    1. 1材料
    1. 2方法
2结果
    2.1重组腺病毒的扩增
    2.2C3H10T1/2细胞形态观察
    2.3流式细胞术检测转染效率
    2.4Westernblot法检测心肌特异性蛋白Cx43、cTnT的表达
    2.5免疫荧光技术定位Cx43在细胞内的表达
    2.6qRT-PCR检测心肌特异性基因GATA4、MEF2C表达
3讨论


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3394995