高通量药物筛选病毒芯片的研制

发布时间：2021-09-17 03:51

　　G蛋白偶联受体（G protein-coupled receptors, GPCR）作为最大的人膜蛋白受体家族，在细胞存活、维持细胞平衡、免疫监测、分子转运及神经调节等方面具有重要作用。因此目前全球市场70%以上的治疗药物都是针对GPCR,因此日益成为生物医药研究的重点、热点和难点。但是GPCR高度疏水的7次跨膜结构，灵活的构象仍然给体外研究其功能活性造成了巨大的困难，因此构建一种筛选GPCR功能活性的平台无疑对药物高通量筛选具有重要意义。目前新药筛选方法主要是在药物与某一种细胞GPCR相互作用后，借助荧光共振能量转移（fluorescence resonance energy transfer, FRET）等生物物理方法，检测细胞内分子间相互作用激发的化学荧光信号，从而发现具有特定疗效的药物。虽然这种在细胞水平的方法稳定、适于自动化，但是仍然存在无效信号或信号偏差导致筛选过程复杂化，成本高、集成度小、筛选效率低。因为病毒包膜上有许多规则排列的糖蛋白，如HSV-1的主要包膜糖蛋白gB（glycoprotein B, gB）、gC （glycoprotein C, gC）,所以本研究中提... 

【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：99 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

GPCR上游信号传导简图

1 绪 论控人体内特定信号通路的活性化合物、抗体和基因 (Alan, 1999; Williams C,2004)，并得到相应数据库支持运转。高通量方法从系统生物学的角度进行研究，相比传统的研究方法具有微量、快速、灵敏和准确的优势，并得以广泛应用。药物 HTS 能在短时间内，进行低成本的最大数量的进行活性药物的筛选，简言之就是可以通过一次实验获得药物的大量的信息，并从中找到有价值的信息，为许多复杂疾病机理的治疗带来了希望。

钚浴⒒?虿?锏壬秆×煊蛱逑至饲八?从械挠τ眉壑?（图1.3）。(Glickman JF&Schmid A, 2008；Hu S et al., 2010, Taylor HD et al., 2007)。例如目前主要的药物 HTS方法有以下几类：1.2.1 细胞标记的药物 HTS ( signal pathway dependent )药物作用 GPCR 后，必然对细胞内基因表达进行调控，所以药物的药理活性主要体现在细胞内一系列信号分子的时空变化上，所以我们可以通过对这些分子进行荧光标记来检测这些变化，从而对药效进行表征。主要技术方法如表 1.1( Cheng Z et al., 2010; Labrecque J et al., 2009; Liu K et al., 2008; Ru Z, 2012; Zhao Xet al.,2008 )。5


本文编号：3397908