代谢型谷氨酸受体5-脂多糖作用小胶质细胞的全新靶点初步研究

发布时间：2021-09-30 05:55

　　正常中枢神经系统因血脑屏障的存在使免疫系统的成分不能进入，被认为是免疫特免区。然而，越来越多的证据显示，中枢与免疫系统存在着相互作用。神经通路参与了细胞与体液免疫反应的调控，而免疫系统也主要通过细胞因子来影响中枢神经系统的功能。中枢神经系统内有免疫受体的分布，而免疫系统也有神经受体的表达，它们共用一套相同的信号分子（神经递质，神经肽，细胞因子等）。长久以来，神经-免疫间相互作用的研究都局限于其信号分子与受体间的作用，在神经细胞上往往同时有免疫受体的表达，而在免疫细胞，特别是小胶质细胞上同样也可见到神经受体的表达，那么在这两类受体之间除通过神经递质或免疫因子产生相互作用外，是否在受体蛋白之间存在直接的相互作用，目前尚未见相关报道。为此，本研究，拟以脑小胶质细胞为切入点，就小胶质细胞免疫受体与神经受体是否存在直接的蛋白作用进行探讨，期望所获结果能有助于我们更好地理解神经系统-免疫系统之间的联系，并为临床相关疾病的防治提供有益的理论基础。小胶质细胞广泛分布于中枢神经系统内,参与脑内的固有免疫反应,构成中枢神经系统抵御病原体入侵的第一防线,被认为是正常中枢神经系统中最有代表性的免疫细胞。小胶质... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：148 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

-1处于对数生长期的N9细胞(光镜)

A：(20×) B：(40×)图 2-1-2 处于对数生长期的 EOC 20 细胞(光镜)2.1.1.2.2 细胞蛋白提取方法小心除去培养液，细胞以 PBS 洗 3 次，在细胞培养瓶中加入合适体积的哺乳动物细胞蛋白质抽提试剂(按比例加入 100×的蛋白酶抑制剂)，冰上放置 5min，以细胞刮收集细胞，吸取细胞混悬液入 EP 管，4℃，14000g，离心 20min，取上清液，分装，(50μl/管)，于-70℃冻存，另一部分上清用于检测蛋白浓度2.1.1.2.3 蛋白质定量方法(CBG 法)(1) Bradford 蛋白定量试剂的配制考马斯亮蓝 G-250 0.1g95%乙醇 50ml85%磷酸 100ml双蒸水定容至 1000ml, 滤纸过滤，避光保存。

34NMDAR1 TLR4 共定位图 2-3-1 LPS 刺激前后 N9 细胞 TLR4 与 NMDAR1 受体的免疫荧光及共定位图像红色荧光代表 TLR4 受体，绿色荧光代表 NMDAR1 受体，黄色为合并后的共定位图片。A，B，C，D，E 分别为 LPS 刺激 0，30min，1h，2h，4h 后的图片，F 为一抗二抗都未用的阴性对照图片，G 为只用二抗未用一抗的阴性对照图片

【参考文献】：
期刊论文
[1]选择性代谢性谷氨酸受体5激动剂CHPG对创伤性神经元损伤的保护作用研究[J]. 陈继军,李随芬,李超,赵鹏,尹文.  现代生物医学进展. 2011(24)
[2]代谢型谷氨酸受体5在大鼠急性脑缺血中的变化[J]. 张茂林,刘俊平,杨巧莲,周立社,吴跃华.  包头医学院学报. 2007(05)
[3]代谢型谷氨酸受体的药理学、生理学及其与癫痫的关系[J]. 刘子建.  中国组织化学与细胞化学杂志. 2003(01)



本文编号：3415263