串珠素对体外培养破骨细胞活性的影响
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【摘要】:目的观察串珠素(Perlecan)对体外培养破骨细胞活性的影响。 方法取3-4周龄Wistar大鼠骨髓细胞悬液,用含la,25(OH)2D3(10-7mol/L),15%的胎牛血清的α-MEM培养基对其诱导培养3天,然后随机分为A、B、C、D四组,A组即对照组,B、C、D在不同时间点按1:1000比例分别加入串珠素抗体,加入时间分别为:B组第4-5天,C组第6-7天,D组第8-9天。观察诱导培养第九天时抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphate,TRAP)染色情况及甲苯胺蓝染色骨磨片骨吸收陷窝情况,利用ELISA法检测各组串珠素表达量的变化。 结果四组培养细胞均有TRAP染色阳性破骨细胞生成,并在骨磨片上形成骨吸收陷窝,且均检测到串珠素的表达,但A组TRAP染色阳性破骨细胞数目及吸收陷窝数目最低,D组次之,B组最高。串珠素的表达量A组最高,D组次之,B组最低。 结论串珠素对体外培养破骨细胞具有抑制作用,且在分化早期阶段作用更强,对破骨细胞生成及骨吸收能力抑制效应更大。
【关键词】:串珠素 破骨细胞 1a 25(OH)_2D3 抗酒石酸酸性磷酸酶
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2013
【分类号】:R329.2
【目录】:
- 摘要2-3
- Abstract3-5
- 引言5-6
- 第一章 材料与方法6-9
- 1.1 材料6-7
- 1.1.1 实验动物6
- 1.1.2 主要试剂与仪器6-7
- 1.2 方法7-9
- 1.2.1 骨磨片及盖玻片的制备7
- 1.2.2 1%甲苯胺蓝液的配制7
- 1.2.3 诱导剂的配制7
- 1.2.4 破骨细胞的分离培养7
- 1.2.5 破骨细胞的预诱导与实验分组7
- 1.2.6 破骨细胞的形态观察及鉴定7-8
- 1.2.7 统计学分析8-9
- 第二章 结果9-10
- 2.1 破骨细胞形态观察9
- 2.2 破骨细胞TRAP染色及计数9
- 2.3 骨磨片观察吸收陷窝情况9
- 2.4 ELISA法检测各组串珠素表达量的变化9-10
- 第三章 讨论10-11
- 结论11-12
- 参考文献12-13
- 附图13-18
- 附表18-20
- 综述20-32
- 综述的参考文献27-32
- 攻读学位期间的研究成果32-33
- 致谢33-34
【参考文献】
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本文编号:343453
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