1型多聚ADP核糖合成酶与Twist-1相互作用调控microRNA-199a/214基因转录机制研究

发布时间：2021-10-28 09:30

　　目的：本文主要目的在于研究心肌细胞系H9c2细胞中PARP-1与Twist-1相互作用调控microRNA199a/214转录表达的机制。方法及结果：我们应用免疫共沉淀及蛋白质-蛋白质间相互作用的实验方法证实在心肌细胞系H9c2细胞中Twist-1可以与PARP-1结合，并且Twist-1能被PARP-1多聚ADP核糖化修饰。应用实时定量PCR的方法，我们检测了H9c2细胞中microRNA-199a/214的表达情况，应用凝胶迁移实验我们研究了Twist-1的DNA结合能力，结果显示：PARP抑制剂3AB或PJ34,或PARP-1siRNA能抑制H9c2细胞中Twist-1与DNA的结合，降低microRNA-199a/214的表达量。结论：在心肌细胞系H9c2细胞中PARP-1通过与Twist-1结合同时对其进行多聚ADP核糖化修饰促进了Twist-1的转录激活和其下游靶基因microRNA-199a/214表达。 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：39 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

免疫共沉淀实验结果：将培养的心肌细胞系H9c2细胞核抽提物分别与抗PARP-1抗体，抗PAR抗体，非特异性IgG抗体加入ProteinA-Sepharosebeads后各自共孵育，

图4重组纯蛋白Westernblot结果

凝胶迁移实验结果：A:在培养的心肌细胞系H9c2细胞中，转染PARP-1siRNA后，Twist-1DNA结合力检测结果


本文编号：3462625