Rho/MRTF-A信号通路在TNF-α和IL-1β诱导间充质干细胞迁移中的作用研究
发布时间：2021-11-02 06:13
间充质干细胞不仅具有多向分化潜能,还能靶向迁移到损伤部位、慢性炎症部位及肿瘤部位,对于这些部位起到一定程度的修复作用。对于间充质干细胞迁移机制的研究,有助于帮助我们理解并提高间充质干细胞的“归巢”能力,为自体修复和细胞治疗提供理论依据。有文献报道,炎症因子TNF-α、IL-1β可以诱导问充质干细胞的迁移,但是具体的迁移机制尚不清楚。本研究首先利用50 ng/mLTNF-α和50 ng/mLIL-1β分别处理间充质干细胞建立诱导细胞迁移模型。培养诱导72小时后,通过划痕实验和迁移小室实验证实TNF-α、IL-1β可以诱导间充质干细胞的迁移。然后利用RT-PCR和Western Blot的方法检测了MYL9和CYR61的表达,结果发现MYL9和CYR61表达上调。进一步用RT-PCR的方法检测基质金属蛋白酶MMP2、MMP9以及其抑制剂TIMP1、 TIMP2的水平,结果发现MMP9mRNA水平明显上调。Rho/MRTF-A信号通路广泛参与细胞迁移过程,通过用10 μmol/L Rho信号通路的抑制剂Y27632对细胞预处理,然后诱导迁移,证明Rho信号通路的抑制降低了细胞的迁移能力。同时...
【文章来源】：天津科技大学天津市
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－１首次换液后原代ＭＳＣｓ?（ｌＯＯｘ）??巧ｇ．?３－１?Ｐｒｉｍａｒｙ?ＭＳＣｓ?ｃｈａｎｇｅｄ?ｍｅｄｉｕｍ?ｆｏｒ?化ｅｆｒｉｓｔ?ｔｉｍｅ?（１０〇ｘ）??
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ＭＹＬ９的表达升高。因此，在本研究中，我们选用了?ＣＹＲ６１、ＭＹＬ９作为标志物来检??测细胞迁移能力的变化。??民Ｔ－ＰＣＲ、Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ的实验结果如图３－７和图３－８所示。从图中可Ｗ看到，经??过ＴＮＦ－Ｕ诱导７２?ｈ后，ＣＹＲ６１、ＭＹＬ９在ｍＲＮＡ水平和蛋白水平表达量均有所升高。??说明ＴＮＦ－ａ的诱导可Ｗ通过上调ＣＹＲ６Ｋ?ＭＹＬ９的表达来改变细胞骨架，增强细胞??的运动能力。??ＣＹＲ６１??ＭＹＬ９??ＧＡＰＤＨ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＴＮＦ－ａ??图３－７?ＴＮＦ－ａ诱导细胞迂移ｍａｒｋｅｒｓ的ｍＲＮＡ表达水平??Ｆｉｇ．?３－７?Ｔｈｅ?ｍＲＮＡ?ｌｅｖｅｌｓ?ｏｆ?ｍ．ｉｇｒａｔｉｏｎ?ｍａｒｋｅｒｓ?ｉｎ?ＭＳＣｓ?化ｅａｔｅｄ?ｗｉ化?ＴＮＦ－ａ??ｍｙｌ．９｜制嘯嚇齡‘??ＣＹＲ６Ｊ?＇ｌｌ?麵ｉｉｉｉｙｉｕｉｉｉｉｉｉｒ??Ｐ－３．Ｃｔｉ?技斷細??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＴＮＦ－ａ??图３－８?ＴＮＦ－ａ诱导细胞迁移ｍａｒｋｅｒｓ的蛋白表达水平?．??Ｆｉｇ．?３－８?Ｔｈｅ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｌｅｖｅｌｓ?ｏｆ?ｍｉ呂ｒａｔｉｏｎ?ｍａｒｋｅｒｓ?ｉｎ?ＭＳＣｓ?化ｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＴＮＦ－ａ??３．２．３?ＴＮＦ－ａ诱导对于基质金属蛋白酶表达的影口向??细胞迁移能力发生变化时通常伴随细胞基质环境的变化。基质金属蛋白酶??（ＭＭＰｓ）及其抑制剂（ＴＩＭＰｓ）在维持细胞的基质环境中起着极其重要的作用。基??质金属蛋白酶的主要生理作用就是降解细胞基质，解除细胞的运动障碍，其抑制剂在??正常的生理状态下与基质金属蛋白酶Ｗ?１：１结合
【参考文献】：
期刊论文
[1]Hepatocyte Growth Factor Gene-modified Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells Transplantation Promotes Angiogenesis in a Rat Model of Hindlimb Ischemia[J]. 苏冠华,孙雨霏,卢永昕,帅欣欣,廖玉华,刘启云,韩俊,罗平. Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2013(04)
[2]血管内皮生长因子通过PKC途径促进骨髓源间充质干细胞迁移[J]. 李雅彬,张金平,姚伟,王辉,唐俊明,杨建业. 郧阳医学院学报. 2010(03)
[3]腺病毒介导的人基质细胞衍生因子-1基因转移促进间充质干细胞的迁移[J]. 王一平,唐俊明,郭凌郧,孔霞,杨建业,陈龙,黄永章,王家宁. 南方医科大学学报. 2008(07)
硕士论文
[1]脐带间充质干细胞体外扩增研究及其分泌细胞因子的高通量筛查[D]. 刘婷.中国人民解放军军事医学科学院 2012
本文编号：3471489
【文章来源】：天津科技大学天津市
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－１首次换液后原代ＭＳＣｓ?（ｌＯＯｘ）??巧ｇ．?３－１?Ｐｒｉｍａｒｙ?ＭＳＣｓ?ｃｈａｎｇｅｄ?ｍｅｄｉｕｍ?ｆｏｒ?化ｅｆｒｉｓｔ?ｔｉｍｅ?（１０〇ｘ）??
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ＭＹＬ９的表达升高。因此，在本研究中，我们选用了?ＣＹＲ６１、ＭＹＬ９作为标志物来检??测细胞迁移能力的变化。??民Ｔ－ＰＣＲ、Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ的实验结果如图３－７和图３－８所示。从图中可Ｗ看到，经??过ＴＮＦ－Ｕ诱导７２?ｈ后，ＣＹＲ６１、ＭＹＬ９在ｍＲＮＡ水平和蛋白水平表达量均有所升高。??说明ＴＮＦ－ａ的诱导可Ｗ通过上调ＣＹＲ６Ｋ?ＭＹＬ９的表达来改变细胞骨架，增强细胞??的运动能力。??ＣＹＲ６１??ＭＹＬ９??ＧＡＰＤＨ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＴＮＦ－ａ??图３－７?ＴＮＦ－ａ诱导细胞迂移ｍａｒｋｅｒｓ的ｍＲＮＡ表达水平??Ｆｉｇ．?３－７?Ｔｈｅ?ｍＲＮＡ?ｌｅｖｅｌｓ?ｏｆ?ｍ．ｉｇｒａｔｉｏｎ?ｍａｒｋｅｒｓ?ｉｎ?ＭＳＣｓ?化ｅａｔｅｄ?ｗｉ化?ＴＮＦ－ａ??ｍｙｌ．９｜制嘯嚇齡‘??ＣＹＲ６Ｊ?＇ｌｌ?麵ｉｉｉｉｙｉｕｉｉｉｉｉｉｒ??Ｐ－３．Ｃｔｉ?技斷細??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＴＮＦ－ａ??图３－８?ＴＮＦ－ａ诱导细胞迁移ｍａｒｋｅｒｓ的蛋白表达水平?．??Ｆｉｇ．?３－８?Ｔｈｅ?ｐｒｏｔｅｉｎ?ｌｅｖｅｌｓ?ｏｆ?ｍｉ呂ｒａｔｉｏｎ?ｍａｒｋｅｒｓ?ｉｎ?ＭＳＣｓ?化ｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ＴＮＦ－ａ??３．２．３?ＴＮＦ－ａ诱导对于基质金属蛋白酶表达的影口向??细胞迁移能力发生变化时通常伴随细胞基质环境的变化。基质金属蛋白酶??（ＭＭＰｓ）及其抑制剂（ＴＩＭＰｓ）在维持细胞的基质环境中起着极其重要的作用。基??质金属蛋白酶的主要生理作用就是降解细胞基质，解除细胞的运动障碍，其抑制剂在??正常的生理状态下与基质金属蛋白酶Ｗ?１：１结合
【参考文献】：
期刊论文
[1]Hepatocyte Growth Factor Gene-modified Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells Transplantation Promotes Angiogenesis in a Rat Model of Hindlimb Ischemia[J]. 苏冠华,孙雨霏,卢永昕,帅欣欣,廖玉华,刘启云,韩俊,罗平. Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2013(04)
[2]血管内皮生长因子通过PKC途径促进骨髓源间充质干细胞迁移[J]. 李雅彬,张金平,姚伟,王辉,唐俊明,杨建业. 郧阳医学院学报. 2010(03)
[3]腺病毒介导的人基质细胞衍生因子-1基因转移促进间充质干细胞的迁移[J]. 王一平,唐俊明,郭凌郧,孔霞,杨建业,陈龙,黄永章,王家宁. 南方医科大学学报. 2008(07)
硕士论文
[1]脐带间充质干细胞体外扩增研究及其分泌细胞因子的高通量筛查[D]. 刘婷.中国人民解放军军事医学科学院 2012
本文编号：3471489
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