人腺病毒六邻体高变区蛋白的亚克隆表达及纯化

发布时间：2021-11-10 03:51

　　目的 克隆表达人腺病六邻体高变区片段,了解其结构和功能,为研发腺病毒基因工程重组疫苗奠定基础。方法 根据生物信息学软件预测的腺病毒六邻体的高变区域,选择目标基因,设计其对应的引物,并以团队保存的人腺病毒六邻体核酸序列为模板,聚合酶链反应扩增目标基因,定向插入载体pQE32中构建工程质粒。通过酶切和基因测序鉴定阳性工程质粒,并诱导其在大肠杆菌M15中高效表达带有组氨酸标记的靶蛋白,应用镍树脂亲和层析的方法分离纯化靶蛋白。结果 构建了含有人腺病毒六邻体高变区片段的重组质粒,同时探索出其在大肠杆菌M15中高效表达的条件,纯化目标蛋白,其分子量约为188 000,与应用生物信息学分析预测的结果相同。结论 成功地克隆、表达和纯化了人腺病毒六邻体高变区片段。 

【文章来源】：国际免疫学杂志. 2019,42(03)

【文章页数】：6 页


本文编号：3486519