HCV NS3基因转化人肝细胞及其机制研究

发布时间：2021-11-14 17:43

　　丙型肝炎病毒（HCV）感染是目前影响人类健康的严重问题,它的持续感染可引起慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌（HCC）的发生,但对于HCV 持续感染导致慢性肝疾病的机理还不清楚。HCV 是一种RNA 病毒,无逆转录酶活性,只在细胞胞浆内复制,不能与宿主基因整合,主要是通过其表达的蛋白质起作用。尽管对于HCV 是否直接参与肝细胞恶性转化这一问题尚不清楚,但已有研究显示HCV 的结构蛋白C 和非结构蛋白NS3、NS4B、NS5A 具有致癌作用。其中HCV NS3 蛋白（核苷酸3420⁵312,含631 个氨基酸残基）是一个多功能的蛋白质,其N 端1/3 具有丝氨酸蛋白酶活性,C 端2/3 则表现为解旋酶和NTP 酶活性,HCV NS3 介导的蛋白酶解过程是病毒在体内复制所必需。因HCV NS3 在病毒生活周期中起重要作用,并可和宿主蛋白相互作用,故其在HCV 相关性HCC 中的作用已成为研究的热点之一。HCV 为嗜肝细胞病毒,其自然宿主细胞是人或黑猩猩的肝细胞,采用非肝细胞作为研究体系,不能真实反映HCV 感染的自然进程,而以往的大部分研究均未采用肝细胞。因此本研究首次选用人... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：112 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

转染后经G418筛选2周获得的阳性克隆，

测转染细胞基因组 DNA 产物 M: 100bp 分子HCNS3/QSG 细胞，2: pRcCMV/QSG 细胞，32 3 4 5 6 estern Blot 检测 HCV NS3 蛋白的表达S3/QSG 转染细胞获得的 7 个克隆，8、9 分别SG7701 细胞，上图显示 NS3 蛋白的表达，而

疫细图 4. Western Blot 检测 HCV NS3 蛋白的表达，1~7 分别代表pRcHCNS3/QSG 转染细胞获得的 7 个克隆，8、9 分别代表 pRcCMV/QSG细胞和 QSG7701 细胞，上图显示 NS3 蛋白的表达，而下图为 α-tubulin蛋白作为上样量对照胞化学检测28

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3495071