刚地弓形虫致BALB/c小鼠睾丸细胞损伤作用的研究

发布时间：2021-11-22 01:15

　　目的:本实验采用刚地弓形虫RH强毒株速殖子感染BALB/c雄性小鼠,建立雄性生殖毒性的小鼠模型,采用RNA原位杂交法检测虫体能否侵入小鼠睾丸及附睾;利用透射电镜观察弓形虫感染后小鼠睾丸组织超微结构的改变;采用单细胞凝胶电泳检测弓形虫感染是否导致小鼠睾丸细胞DNA损伤;采用分光光度法检测弓形虫感染对小鼠血清及睾丸组织氧自由基水平的影响,探讨弓形虫致小鼠睾丸细胞损伤的作用。方法:1.将20只BALB/c雄性小鼠随机分为感染组（16只）和正常对照组（4只）,其中感染组小鼠腹腔注射弓形虫速殖子2.5×103个/0.2 ml/只,正常对照组腹腔注射无菌PBS（0.01 mol/L, pH=7.4）0.2ml/只,于攻虫第1,3,5,7天分别处死感染组小鼠4只和正常对照组1只,取睾丸及附睾,4 %多聚甲醛固定,石蜡包埋,切片（7μm）,采用RNA原位杂交法检测虫体能否侵入小鼠睾丸及附睾组织。2.将10只BALB/c雄性小鼠随机分2组,每组5只。正常对照组腹腔注射无菌PBS 0.2 ml/只;感染组腹腔注射纯化的弓形虫速殖子2.5×103个/0.2 ml/只。感染7天后处死各组小鼠,取睾丸组织1mm... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：39 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

生精细胞胞质内的弓形虫（红箭头所示400×）

0.00±0.00a 4.67±1.53a 107.33±9.07b 426.00±有统计学差别 P < 0.01.图 1-1 生精细胞胞质内的弓形虫（红箭头所示 400×）

图 1-3 附睾内的弓形虫（红箭头所示 400×）一种广泛流行的疾病，其对雄性生殖系统的影响日渐受到人们弓形虫急性感染小鼠睾丸直接印片中可见到弓形虫速殖子【5, 13】只是从形态上观察，主观性较强；我们采用 RNA 原位杂交技术织中提取核酸，能在成分复杂的组织中进行单一细胞的研究而，并可完整地保持组织和细胞的形态，对于细胞数量少且散在A 或 RNA 的研究十分方便【14】。在探针的设计上，我们选择弓基因 SAG2 基因作为探针来源，此抗原仅存在于速殖子表面，与切关系【15】。该基因的 mRNA 有表达，表明体内有速殖子存在侵袭力。实验中见 mRNA 原位杂交能够清晰显示组织中弓形虫程度高。采用腹腔接种弓形虫速殖子的方法感染小鼠，最终在小鼠睾丸间质、附睾管上皮细胞和附睾管腔的精液中检测到速殖子，且现虫体。现已证明，血睾屏障是由睾丸支持细胞间的紧密连接和

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3510637