人脐静脉内皮细胞永生化及生物学特性的研究

发布时间：2022-01-01 06:15

　　目的 建立永生化人脐静脉内皮细胞（HUVECs）系并探讨永生化对HUVECs增殖、凋亡及成瘤性影响。方法 扩增并提取猿猴病毒40大T抗原（SV40LT）和人端粒酶反转录酶催化亚基（hTERT）基因,反转录病毒载体介导感染HUVECs；筛选2周；聚合酶链反应（PCR）扩增后行琼脂糖凝胶电泳成像鉴定目的基因是否转入HUVECs；细胞计数法比较细胞增殖、流式细胞术检测细胞凋亡、裸鼠成瘤实验检测细胞恶性转化。结果 筛选出抗嘌呤霉素阳性克隆,SV40LT、hTERT成功转入HUVECs；永生化组细胞生长曲线上移,细胞增殖第5、6、7天,SV40LT永生化组及hTERT永生化组与HUVECs组细胞数目差异有统计学意义（P<0.05）,hTERT永生化组和HUVECs组细胞数目差异有统计学意义（P<0.05）；HUVECs组细胞总凋亡率为（11.2±0.9）%,SV40LT永生化组HUVECs总凋亡率为（3.4±0.4）%,hTERT永生化组HUVECs总凋亡率为（2.8±0.4）%,SV40LT永生化组、hTERT永生化组凋亡率均低于HUVECs组（均P<0.05）；两种永生化细... 

【文章来源】：中华实验外科杂志. 2019,36(01)

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本文编号：3561784