孤儿核受体SHP敲减抑制BMP9诱导C3H10T1/2细胞的成骨分化

发布时间：2022-01-06 14:06

　　孤儿核受体SHP（small heterodimer partner）是核受体超家族中的一员,具有LXXLL模体及配体结合域,但无经典的DNA结合域.它可与多种转录因子结合,调节细胞的增殖、分化和代谢等生物学过程.但目前关于SHP在BMP9诱导成骨分化中的确切作用却尚不清楚.本研究证明,SHP参与BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化.RT-PCR结合Western印迹方法检测蛋白揭示,异位表达BMP9上调了SHP在C3H10T1/2细胞中的表达.小干扰RNA敲减SHP基因在C3H10T1/2细胞的表达下调了成骨相关基因Runx2、Id1、Id2及CTGF的表达,而过表达BMP9则可上调这些基因的表达.碱性磷酸酶（ALP）活性测定/染色及茜素红染色显示,敲减核受体SHP基因可抑制BMP9的成骨分化作用,而过表达BMP9可部分消除SHP敲减导致的成骨抑制作用.上述结果提示,核受体SHP为BMP9诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化所必需.究竟BMP9如何上调SHP基因表达,以及SHP究竟通过何种机制上调BMP9下游成骨分化相关基因的表达尚待进一步研究. 

【文章来源】：中国生物化学与分子生物学报. 2015,31(02)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1. 1 材料
    1. 2 穿梭质粒 pS ES-HUS-si SHP 的构建
    1. 3 重组腺病毒质粒 pA d-si SHP 的构建及腺病毒的包装扩增
    1. 4 条件培养基的制备
    1. 5 C3H10T1 /2 细胞培养
    1. 6碱性磷酸酶活性和染色
    1. 7钙盐沉积实验
    1. 8 RT-PCR
    1. 9 Western 印迹
    1. 10 统计学分析
2 结果
    2. 1BMP9 促进间充质干细胞 C3H10T1 /2 细胞中 SHP 的表达
    2. 2Ad-si SHP 可 有 效 下 调 间 充 质 干 细 胞C3H10T1 / 中 SHP 的表达
    2. 3Ad-si SHP-4 对 BMP9 诱导的 C3H10T1 /2 细胞成骨分化的影响
3 讨论



本文编号：3572593