蛇毒金属蛋白酶/去整合蛋白新基因的克隆及其功能研究

发布时间：2022-01-17 17:31

　　蛇毒金属蛋白酶/去整合蛋白是蛇毒中的主要功能蛋白之一，它们是引起伤口流血不止的主要蛇毒成分。到现在为止，已有２０多种蛇毒金属蛋白酶的氨基酸序列被测定，并有四种蛇毒金属蛋白酶的晶体衍射结构被测定。去整合蛋白是一类首先在蛇毒中发现的富含半胱氨酸的多肽，它具有抑制血小板聚集等多种功能,后来研究发现它和ＰⅡ型蛇毒金属蛋白酶属于同一前体。我们利用RT-PCR方法从江浙蝮蛇中克隆出一个含去整合蛋白结构域的基因片段，从测定的片段序列中取出特异的序列作为引物获得它的全长基因。通过序列测定发现，它和以前报道的蛇毒金属蛋白酶序列有很高的同源性（和contortrostatin同源性为78%，和bothrostatin同源性为77%），但它是一个新的蛇毒金属蛋白酶和去整合蛋白基因，而且它的C端去整合蛋白结构域比其他的蛇毒金属蛋白酶多出两个半胱氨酸（Cys407,Cys426），我们把它命名为Agkistin以区别其他蛇毒金属蛋白酶/去整合蛋白。为了研究Agkistin的功能，我们将含有完整去整合蛋白结构域编码区的Agkistin-s小片段（残基344-488）插入到表达质粒pET-28a（+）上，在30℃用... 

【文章来源】：中国科学院大学(中国科学院上海生命科学研究院)上海市

【文章页数】：74 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

蛇毒金属蛋白酶的结构和分类

所示，RGD残基形成一个突出的loop

【参考文献】：
硕士论文
[1]管氏肿腿蜂毒液金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶基因的克隆与功能研究[D]. 李丽芳.西南林业大学 2016
[2]利用生物信息学方法制备尖吻蝮蛇蛇毒DNA疫苗[D]. 张志晓.云南大学 2010



本文编号：3595143