自噬抑制肿瘤坏死因子α诱导人胎盘胎儿来源间充质干细胞发生凋亡

发布时间：2022-02-13 16:01

　　目的:探讨TNF-α诱导人胎盘胎儿来源间充质干细胞（hfPMSCs）发生凋亡和自噬的作用,以及自噬对细胞凋亡的调控作用。方法:利用流式细胞术检测无血清培养hfPMSCs中CD73、CD90、CD105、CD14、CD34、CD45的表达;用终浓度20μg/L的TNF-α处理hfPMSCs 24h,以未处理细胞作为对照组。Annexin V/PI双染色检测TNF-α对hfPMSCs凋亡程度的影响;分别提取各组总蛋白,Western blot检测自噬标志基因LC3Ⅰ/Ⅱ的表达;利用mRFP-GFP-LC3腺病毒感染细胞,观察胞内点状聚集形成的情况;利用Atg5干扰慢病毒（si-Atg5）及阴性对照慢病毒（si-NC）感染hfPMSCs,Annexin V/PI双染色检测TNF-α对慢病毒感染后hfPMSCs凋亡程度的影响。结果:所培养细胞具有典型的MSCs形态,呈CD73⁺CD90⁺CD105⁺/CD14^-CD34^-CD45^-细胞; Annexin V/PI染... 

【文章来源】：中国生物工程杂志. 2019,39(09)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 人胎盘胎儿来源MSCs的培养
        1.2.2 MSCs特异性标志物的鉴定
        1.2.3 细胞凋亡的检测
        1.2.4 自噬标志蛋白LC3Ⅰ/Ⅱ表达的鉴定
        1.2.5 MSCs胞内自噬体的检测
        1.2.6 统计学分析
2 结果
    2.1 MSCs形态观察
    2.2 MSCs表面标志分子的检测
    2.3 TNF-α诱导MSCs发生凋亡
    2.4 TNF-α诱导MSCs自噬的发生
    2.5 TNF-α诱导MSCs自噬体的形成
    2.6 TNF-α诱导的自噬调控MSCs凋亡发生
3 讨论



本文编号：3623489