钙离子通道亚基Cacnb3对小鼠脂肪间充质干细胞成骨分化的促进作用

发布时间：2022-02-15 15:09

　　间充质干细胞在治疗骨相关疾病中具有重要意义,但其在成骨分化中的机制尚未完全阐明。该研究通过分析GEO数据库中有关组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACi）处理过的小鼠成骨前体细胞（MC3T3-E1 preosteoblasts）的生物芯片数据,筛选出22个在成骨分化中上调,在成脂分化中下调,且受HDACi紧密调控的基因。这22个基因中有6个基因（Cacnb3、Lpcat2、Cd248等）与Ca²⁺调节功能相关,提示Ca²⁺可能在MSCs分化中发挥重要作用。在后续实验中,我们观察到电压依赖性钙通道亚单位β3（calcium voltage-gated channel auxiliary subunit beta 3, Cacnb3）和磷脂酰基转移酶2（lysophosphatidylcholine acyltransferase 2, Lpcat2）在小鼠脂肪间充质干细胞（ADSCs）、人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）和小鼠成骨前体细胞（MC3T3-E1）的成骨分化过程中上调,提示Cacnb3、Lpcat2可能参与ADSCs的体外成骨分化。此外,利... 

【文章来源】：中国细胞生物学学报. 2019,41(08)CSCD

【文章页数】：11 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞和芯片数据
    1.2 试剂和仪器
    1.3 数据处理及差异基因分析
    1.4 小鼠ADSCs的原代培养
    1.5 流式细胞术检测ADSCs表面标志物
    1.6 体外成骨分化
    1.7 ALP染色和茜素红染色
    1.8 实时荧光定量核酸扩增检测系统(Real-timequantitative PCR detecting system)
    1.9 MC3T3-E1细胞的转染
    1.1 0 细胞内钙离子水平检测
    1.1 1 统计学方法
2 结果
    2.1 利用生物信息技术筛选成骨相关基因
    2.2 小鼠脂肪间充质干细胞鉴定分析
    2.3 Cacnb3基因在细胞成骨诱导过程中表达升高
    2.4 敲低Cacnb3抑制MC3T3-E1细胞成骨分化
    2.5 成骨不全小鼠中Cacnb3表达降低
3 讨论



本文编号：3626848