利用小鼠骨骼肌细胞持续表达单链胰岛素类似物进行1型糖尿病模型鼠的长效基因治疗

发布时间：2022-02-19 03:29

　　目的探讨Pluronic L64-电脉冲（L/E）体系介导的单链胰岛素类似物基因在骨骼肌组织的传递表达对1型糖尿病小鼠的治疗效果和影响。方法将胰岛素基因中的C肽区域换成（GGGGS）₃,克隆到pcDNA3.1（+）质粒中,构建载体pcDNA-INS。使用链脲佐菌素腹腔注射雄性BALB/c小鼠建立1型糖尿病小鼠模型,并分为L/E联合pcDNA3.1（+）空质粒治疗的L/E-pcDNA3.1（+）组、仅使用pcDNA-INS裸质粒治疗的pcDNA-INS组和L/E联合pcDNA-INS裸质粒治疗的L/E-pcDNA-INS组。模型小鼠在胫骨前肌注射相关质粒进行治疗,且根据治疗方案在注射1 h后进行Pluronic L64-电脉冲处理,并以生理盐水处理的正常小鼠（NC）组作为对照。记录各组小鼠的血糖、体质量、血清胰岛素含量、生存率、免疫组化、外形特征及组织病理等指标。结果 （1）pcDNA-INS质粒通过酶切和测序鉴定无误;（2）与NC组相比,模型小鼠血糖显著上升,体质量显著下降（P<0.05）,且胰岛遭到严重破坏;（3）L/E-pcDNA-INS组的血糖水平和血... 

【文章来源】：四川动物. 2019,38(06)北大核心

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 实验动物
    1.2 试剂及仪器
    1.3 实验方法
        1.3.1 质粒的制备与鉴定
        1.3.2 模型建立及治疗
        1.3.3 血糖和体质量的检测
        1.3.4 生存率检测及小鼠形体观察
        1.3.5 胰岛素检测
        1.3.6 苏木精-伊红(HE)染色病理检测
    1.4 统计学分析
2 结果
    2.1 含胰岛素类似物基因的载体(pcDNA-INS)构建及结果分析
    2.2 糖尿病小鼠模型的建立
    2.3 各组小鼠的血糖水平变化
    2.4 各组小鼠的血清胰岛素含量变化
    2.5 糖尿病小鼠生存率情况及免疫组化结果
    2.6 各组小鼠的形体变化及病理检查结果
3 讨论



本文编号：3632124