H 2 O 2 及碘过量对MT-I/II KO 小鼠脾脏的影响

发布时间：2022-02-21 15:01

　　一、H2O2对MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾脏的影响目的脑缺血再灌注早期,脾脏中有大量炎症介质浸润,导致脑缺血再灌注后脾细胞出现大量凋亡,严重影响脑缺血再灌注病人的预后。用H202诱导WT小鼠及MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾细胞和线粒体,并观察抗氧化剂NAC和SOD抑制剂DETC对其的干预作用。探讨外源性H2O2对小鼠脾细胞活力的影响及NAC、DETC、 MT-Ⅰ/Ⅱ对H2O2诱导的脾细胞氧化应激损伤的作用,为保护脑缺血再灌注后脾细胞免受氧化应激损伤寻求新的思路。方法1.制备WT小鼠及MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾细胞悬液,将细胞分为不同浓度H2O2（0,0.1,0.2,0.5,1,2mM）处理组,2h后MTT比色法检测细胞活力；2.荧光探针MitoSOX对不同浓度H2O2（0,0.1,0.2,0.5,1,2mM）处理2h的脾细胞进行染色,在荧光显微镜下对比观察各浓度组荧光强度；3.在细胞水平上,用0.5mM H2O2诱导WT小鼠及MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾细胞,并分别用NAC、DETC作干预处理,2h后MTT比色法检测细胞活力；4.分别检测NAC、DETC处理的0.5mM H2O2诱导的WT小鼠及MT-Ⅰ... 

【文章来源】：天津医科大学天津市211工程院校

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
符号说明
前言
    一、H_2O_2对MT-1/n K0小鼠脾脏的影响
        研究现状、成果
        研究目的、方法
    二、碘过量对MT-I/IIK0小鼠脾脏的影响
        研究现状、成果
        研究目的、方法
一、H_2O_2对MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾脏的影响
    实验一 不同浓度H_2O_2对MT-Ⅰ/ⅡKO小鼠脾细胞活力的影响
        1.1 对象和方法
            1.1.1 实验动物的来源及饲养繁育
            1.1.2 主要仪器
            1.1.3 主要试剂
            1.1.4 主要溶液的配制
            1.1.5 脾细胞悬液的制备
            1.1.6 MTT检测细胞活力
            1.1.7 观察线粒体超氧化物的量
            1.1.8 统计方法
        1.2 结果
            1.2.1 MTT检测结果
            1.2.2 观察线粒体超氧化物的量
        1.3 讨论
        1.4 小结
    实验二 抗氧化剂NAC对MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾细胞氧化应激损伤的影响
        2.1 对象和方法
            2.1.1 主要仪器
            2.1.2 主要试剂
            2.1.3 主要溶液的配制
            2.1.4 MTT检测细胞活力
            2.1.5 细胞损伤检测
            2.1.6 观察线粒体超氧化物的量
            2.1.7 脾细胞线粒体的制备
            2.1.8 线粒体肿胀检测
            2.1.9 统计方法
        2.2 结果
            2.2.1 MTT检测结果
            2.2.2 细胞损伤检测结果
            2.2.3 观察线粒体超氧化物的量
            2.2.4 线粒体肿胀检测
        2.3 讨论
        2.4 小结
    实验三 SOD抑制剂DETC对MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾细胞氧化应激损伤的影响
        3.1 对象和方法
            3.1.1 主要仪器
            3.1.2 主要试剂
            3.1.3 主要溶液的配制
            3.1.4 MTT检测细胞活力
            3.1.5 细胞损伤检测
            3.1.6 观察线粒体超氧化物的量
            3.1.7 线粒体肿胀检测
            3.1.8 统计方法
        3.2 结果
            3.2.1 MTT检测结果
            3.2.2 细胞损伤检测结果
            3.2.3 观察线粒体超氧化物的量
            3.2.4 线粒体肿胀检测
        3.3 讨论
        3.4 小结
二、碘过量对MT-Ⅰ/Ⅱ KO小鼠脾脏的影响
    1 对象和方法
        1.1 实验动物的来源、饲养及繁育
        1.2 主要仪器
        1.3 主要试剂
        1.4 主要溶液的配制
        1.5 动物模型的建立及分组
        1.6 取材和标本的制备
        1.7 HE化学染色
        1.8 统计方法
    2 结果
        2.1 脾脏的脏体比
        2.2 HE染色
    3 讨论
    4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述 金属硫蛋白在多器官中的抗氧化作用
    综述参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]运动对骨骼肌线粒体通透性转换孔及细胞凋亡的影响[J]. 王冬梅,董军,漆正堂,丁树哲.  西安体育学院学报. 2011(04)
[2]Dietary zinc and metallothionein on small intestinal disaccharidases activity in mice[J]. Cuong D Tran,Johanna Cool,Cory J Xian.  World Journal of Gastroenterology. 2011(03)
[3]过氧化氢对FRTL细胞线粒体膜电位和超氧化物生成的影响[J]. 李敏,李兰英,陈祖培,姚小梅.  天津医药. 2010(03)
[4]碘盐与碘致甲状腺疾病的现状[J]. 符兆胤,张嘉越.  医学综述. 2009(10)
[5]低碘大鼠脾脏淋巴细胞超微结构研究[J]. 李金茹,陈雪娴.  天津医科大学学报. 2001(03)
[6]碘对脾的形态学影响[J]. 陈雪娴,刘金宝,王春艳,刘皓,张菊芳,韩颉.  中国地方病学杂志. 1994(01)



本文编号：3637497